MRI引導(dǎo)聚焦超聲開(kāi)放家兔血腦屏障靶向甲氨蝶呤給藥.pdf

1、目的： 探討MRI引導(dǎo)聚焦超聲靶向可逆性開(kāi)放兔腦血腦屏障（BBB）并甲氨喋呤（MTX）腦內(nèi)給藥的效果。 方法： MRI引導(dǎo)聚焦超聲以2s-10s不同時(shí)長(zhǎng)輻照20只新西蘭大白兔腦，共輻照50個(gè)靶點(diǎn)，并將靶點(diǎn)分為2s、4s、6s、8s和10s組，通過(guò)靶點(diǎn)MRI增強(qiáng)掃描、伊文氏藍(lán)（EB）染色和HE組織學(xué)檢查的方法確立靶向可逆性開(kāi)放BBB的輻照時(shí)長(zhǎng)參數(shù)（6s）；再以此參數(shù)輻照已靜注MTX的5只兔右腦，1小時(shí)后取靶點(diǎn)組織

2、作為超聲輻照組，取靶點(diǎn)外的左腦相應(yīng)組織為靜脈對(duì)照組；另取5只兔不行輻照，由頸內(nèi)動(dòng)脈注射同劑量MTX，1小時(shí)后取相應(yīng)腦組織為頸內(nèi)動(dòng)脈組。以高效液相色譜法測(cè)定、比較各組腦組織MTX的濃度。 結(jié)果： 1、靶點(diǎn)MRI增強(qiáng)掃描：超聲輻照后的當(dāng)即、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)MRI重復(fù)增強(qiáng)掃描，結(jié)果顯示輻照時(shí)長(zhǎng)2s和4s的兔腦始終沒(méi)有增強(qiáng)，輻照時(shí)長(zhǎng)為6s、8s和10s者在照射后當(dāng)即靶點(diǎn)均有增強(qiáng)，至4小時(shí)仍明顯；8小時(shí)以后6s組

3、無(wú)增強(qiáng)；8s組直到24小時(shí)以后仍有增強(qiáng)，但范圍開(kāi)始減少，10s組則更為明顯，所有時(shí)間點(diǎn)均可見(jiàn)增強(qiáng)顯影。 2、靶點(diǎn)EB染色：超聲輻照當(dāng)即的靶點(diǎn)腦組織2s組、4s組未見(jiàn)藍(lán)染，6s組、8s組和10s組均見(jiàn)藍(lán)染，并且隨幅照時(shí)長(zhǎng)的增加，藍(lán)染的程度和范圍增大，同時(shí)藍(lán)染的解剖部位與MRI增強(qiáng)部位一致。超聲輻照24小時(shí)后靶點(diǎn)腦組織2s組、4s組和6s組未見(jiàn)藍(lán)染，8s組和10s組仍有藍(lán)染，10s組更明顯，但程度和范圍均較前減小。 3、HE

4、染色組織學(xué)檢查：超聲輻照后當(dāng)即，取輻照時(shí)長(zhǎng)從2s到10s的靶點(diǎn)行HE染色組織學(xué)檢查，2s、4s組靶點(diǎn)光鏡下未見(jiàn)異常，與非靶點(diǎn)區(qū)腦組織未見(jiàn)區(qū)別；6s組散見(jiàn)少許紅細(xì)胞滲出，血管內(nèi)皮細(xì)胞輕微腫脹，但神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)未見(jiàn)明顯異常，8s組可見(jiàn)明顯的紅細(xì)胞滲出，靶點(diǎn)區(qū)腦組織血管破壞明顯，見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞破損及細(xì)胞碎片，腦實(shí)質(zhì)細(xì)胞也出現(xiàn)了不同程度損傷，焦點(diǎn)周?chē)M織出現(xiàn)水腫帶。隨照射時(shí)長(zhǎng)的增加，這種改變的程度和范圍更為明顯，10s組見(jiàn)血管破裂、紅細(xì)胞廣

5、泛滲出，血管內(nèi)血栓形成，可見(jiàn)少量炎細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞明顯腫脹，組織液化壞死。 4、各組腦內(nèi)甲氨蝶呤濃度：以高效液相色譜法測(cè)定各組腦組織中MTX濃度，靜脈給藥超聲輻照組為7.412±1.471 ug/g腦組織，靜脈給藥對(duì)照組為0.544±0.084 ug/g腦組織，頸內(nèi)動(dòng)脈給藥組為1.984±0.650ug/g腦組織。靜脈給藥對(duì)照組的MTX濃度低于頸內(nèi)動(dòng)脈組（P<0.05），而靜脈給藥輻照組的MTX濃度均顯著高于靜脈對(duì)照組和