以HIV-1 Vif為靶點天然藥物先導(dǎo)化合物的篩選及其藥效學(xué)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)所引起,在不到30年的時間已成為肆虐全世界令人可畏的致死性傳染病,到目前為止已有210多個國家和地區(qū)發(fā)現(xiàn)該種疾病。高效抗逆轉(zhuǎn)錄療法(HAART)的使用雖然在一定程度上有效地遏制艾滋病的傳播,但隨之HIV-1感染者體內(nèi)出現(xiàn)的藥物毒性與抗藥性,以及其昂貴的治療價格等因素導(dǎo)致其繼續(xù)蔓延。因此,尋找新的抗病毒靶點并建立相應(yīng)的藥物篩選平臺顯得尤為重要。近年,HIV病毒感染因子Vif被證實能夠結(jié)合人體抗

2、病毒因子載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣蛋白3G(APOBEC3G),引起抗病毒因子的降解,從而使HIV-1毒粒的感染力增強10-1000倍。Vif和APOBEC3G之間相互作用的研究證實Vif將成為抗HIV藥物開發(fā)的新靶點。 本研究在構(gòu)建出HIV-1 Vif與人APOBEC3G原核表達(dá)蛋白的基礎(chǔ)之上,依賴我國豐富的天然藥物寶庫,利用Biacore技術(shù)對豐富的藥物庫資源進(jìn)行高通量篩選,尋找針對兩個蛋白為靶點的天然藥物有效提取

3、物藥物先導(dǎo)化合物的研究。得到先導(dǎo)化合物CD60%醇提物乙酸乙酯部分,而后構(gòu)建出HIV—1 Vif與人APOBEC3G的真核表達(dá)質(zhì)粒,利用共轉(zhuǎn)染和Western Blot等檢測技術(shù)在真核表達(dá)體系中進(jìn)一步研究得出50μg/ml的CD60%醇提物乙酸乙酯部分能夠?qū)IV-1Vif降解APOBEC3G蛋白產(chǎn)生保護(hù)性作用;最后將所篩選出CD60%醇提物乙酸乙酯部分在細(xì)胞培養(yǎng)體系中進(jìn)行藥效學(xué)評價,利用HIV-1感染MT4的細(xì)胞實驗,結(jié)果證明其對病毒

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