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1、目的構(gòu)建金黃色葡萄球菌RNAⅢ激活蛋白(RNAⅢ-activatingprotein，RAP)重組蛋白表達載體RAP-pQE30，誘導其在大腸桿菌SG13009內(nèi)表達，制取重組蛋白并進行純化，同時檢測其體內(nèi)活性。 方法經(jīng)PCR從金黃色葡萄球菌基因組中克隆出編碼RAP蛋白的基因，轉(zhuǎn)化TG1菌株，提取質(zhì)粒后測序；隨后構(gòu)建RAP-pQE30重組蛋白表達質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化表達菌株SG13009，用IPTG誘導表達重組蛋白，而后用6×HisNi-
2、NTA親和柱純化RAP蛋白。將純化的蛋白作為抗原對小鼠進行皮下注射，再用金黃色葡萄球菌感染小鼠，觀察RAP蛋白是否有預防金黃色葡萄球菌感染的作用。 結(jié)果在經(jīng)IPTG誘導的RAP-pQE30/SG13009全菌蛋白中檢測到相對分子量大小約為40KD的RAP重組蛋白，經(jīng)純化后明顯。將注射純化RAP蛋白組小鼠和對照組小鼠比較，發(fā)現(xiàn)注射RAP組小鼠感染的發(fā)生率小、感染的損傷程度輕。 結(jié)論成功表達并純化了RAP蛋白，且證實它有預防
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