2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、細(xì)胞癌變時(shí)癌細(xì)胞膜上糖蛋白的寡糖鏈發(fā)生改變,即糖基異常變化。各種異常的糖蛋白糖基可影響細(xì)胞的正常功能,如細(xì)胞的識(shí)別和黏附功能障礙,這是導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的分子基礎(chǔ)。 隨著基因組學(xué)、凝集素和質(zhì)譜等技術(shù)在糖鏈檢測(cè)中的應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)了許多與腫瘤相關(guān)的糖鏈結(jié)構(gòu)。β1,6分支是細(xì)胞膜復(fù)雜型N一糖鏈的一種分支結(jié)構(gòu),文獻(xiàn)報(bào)道在結(jié)腸癌和肝癌細(xì)胞中β 1,6分支高表達(dá),并且與預(yù)后差和腫瘤轉(zhuǎn)移程度具有相關(guān)性,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明β1,6分支能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞在小鼠

2、體內(nèi)的轉(zhuǎn)移能力:體外實(shí)驗(yàn)證明β 1,6分支高表達(dá)的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力明顯增強(qiáng)。但最近有文獻(xiàn)報(bào)道在膀胱癌中β1,6分支的表達(dá)與預(yù)后較好有關(guān),在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中高表達(dá)GnT-V能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡等等。因此β 1,6分支在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用以及作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。本論文的研究目的是觀察在小鼠乳腺癌細(xì)胞4TO7中β 1,6分支表達(dá)的差異對(duì)與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的細(xì)胞行為學(xué)的影響,并初步探討其對(duì)細(xì)胞遷移能力影響的機(jī)制。為腫瘤細(xì)胞膜糖鏈β1,6分支與腫瘤轉(zhuǎn)

3、移的關(guān)系研究提供了新途徑。 第一部分:細(xì)胞表面β 1,6分支糖鏈對(duì)小鼠乳腺癌細(xì)胞腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)行為學(xué)的影響本部分實(shí)驗(yàn)用RNA干擾的方法構(gòu)建了GnT-V表達(dá)差異的兩株小鼠乳腺癌細(xì)胞4T07-siRNA3和4TO7-mock,并對(duì)它們的轉(zhuǎn)移相關(guān)細(xì)胞行為學(xué)進(jìn)行了研究。 首先針對(duì)小鼠GnT-V的DNA序列設(shè)計(jì)并構(gòu)建了用于轉(zhuǎn)染小鼠乳腺癌4TO7細(xì)胞的干擾質(zhì)粒:pSi/encerU6-siRNA1,psilencefU6-siRNA2

4、和pSilenceru6-siRNA3。用以上質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞并挑取陽(yáng)性單克隆。獲得了細(xì)胞表面表達(dá)β1,6分支降低約60%的細(xì)胞模型:4TO7-siRNA3。然后運(yùn)用劃痕法、Transwell小室法檢測(cè)了4TO7-siRNA3細(xì)胞遷移行為的改變:用Metrigel模擬細(xì)胞外基質(zhì),檢測(cè)了4TO7-siRNA3細(xì)胞侵襲行為的改變;運(yùn)用細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)FN黏附能力的改變:最后用熒光標(biāo)記的鬼比環(huán)肽檢測(cè)細(xì)胞遷移時(shí)微絲的變化。結(jié)果表明

5、:相對(duì)于陰性對(duì)照4TO7-siRNA3細(xì)胞與FN黏附增強(qiáng),遷移和侵襲能力降低,而且β1,6分支表達(dá)降低能夠影響細(xì)胞骨架actin的解聚和聚合功能。 第二部分:高表達(dá)β1,6分支糖鏈增強(qiáng)小鼠乳腺癌細(xì)胞4TO7遷移能力的機(jī)制探討本部分以β1,6分支對(duì)EGFR的影響為切入點(diǎn)對(duì)β1,6分支表達(dá)增高能夠顯著增強(qiáng)小鼠乳腺癌細(xì)胞4TO7遷移能力的機(jī)制進(jìn)行了仞步探討。在表皮生長(zhǎng)因子EGF的刺激下4TO7-mock細(xì)胞的遷移分為兩個(gè)階段,8小時(shí)之

6、后遷移速度存在著一個(gè)明顯的突躍。本部分實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了4TO7-siRNA3和4TO7-mock細(xì)胞上EGFR表達(dá)水平和EGFR上β1,6分支修飾,EGF刺激下兩株細(xì)胞遷移時(shí)EGFR的磷酸化、PKC-δ和Erk信號(hào)的激活情況,結(jié)果表明:EGFR上增加了的β 1,6分支糖鏈修飾能夠增強(qiáng)遷移的第二個(gè)階段中Erk和PKC-δ的信號(hào)強(qiáng)度,而抑制了與細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)密切相關(guān)的RhoA的信號(hào)。β1,6分支通過(guò)增加EGFR的糖鏈修飾,進(jìn)而影響其下游信號(hào)通路信號(hào)

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