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1、目的:分析PY20抗體流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CML細(xì)胞酪氨酸磷酸化水平在CML診斷、病情監(jiān)測(cè)及療效判斷中的應(yīng)用,并比較其與bcr-abl融合基因和Ph染色體檢測(cè)結(jié)果的符合率。 方法:采用PY20抗體通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)多色免疫熒光方法檢測(cè)28例初診慢性粒細(xì)胞白血病患者及不同分期、治療前后PY20陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)水平,比較其與筑巢式反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)bcr-abl融合基因及R顯帶細(xì)胞遺傳學(xué)分析Ph染色體結(jié)果的符合率。同時(shí)隨訪監(jiān)測(cè)
2、7例異基因造血干細(xì)胞移植后患者的PY20陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率、bcr-abl融合基因及Ph染色體結(jié)果的變化,并分析其意義。 結(jié)果: 1.28例初診CMI_,患者PY20陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率為(65.71±1.31)%,其中慢性期、加速期、急性變期的陽(yáng)性率分別為:(40.31±1.22)%、(77.28±1.14)%,(78.12±1.32)%。CML慢性期PY20細(xì)胞陽(yáng)性率低于加速期或急變期,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),加速期
3、和急變期無(wú)差異(P>0.05)。10例正常對(duì)照及5例ITP、5例AML PY20細(xì)胞均為陰性表達(dá)。外周血與骨髓標(biāo)本PY20結(jié)果無(wú)差別(P>0.05)。 2.28例初診CML患者經(jīng)治療后獲得臨床CR的患者14例,PR患者12例,NR患者2例。獲CR、PR、NR的患者其PY20細(xì)胞表達(dá)陽(yáng)性率分別為(15.56±1.51)%、(38.73±2.31)%、(60.43%±2.04)%。臨床CR患者PY20細(xì)胞陽(yáng)性率明顯低于初診、PR及N
4、R的CML患者(P<0.05)。PR患者低于NR患者(P<0.05)。NR患者與初診患者無(wú)差異(P>0.05)。 3.初診患者PY20細(xì)胞檢測(cè)與RT-PCR檢測(cè)的陽(yáng)性符合率為92.31%,陰性符合率為95.45%;與Ph染色體檢測(cè)的陽(yáng)性符合率為88.46%,陰性符合率為95.46%。 4.對(duì)獲得CR的7例異基因造血干細(xì)胞移植后的患者進(jìn)行監(jiān)測(cè)PY20細(xì)胞陽(yáng)性率、Ph染色體及bcr-abl融合基因變化。7例患者移植后Ph染色
5、體均為陰性,5例移植后bcroabl融合基因?yàn)槌掷m(xù)陰性,而2例bcr-abl融合基因持續(xù)陽(yáng)性。7例PY20細(xì)胞表達(dá)均為陰性。隨訪過(guò)程中無(wú)一例臨床復(fù)發(fā)。 結(jié)論 1、流式細(xì)胞術(shù)PY20抗體檢測(cè)CML細(xì)胞酪氨酸磷酸化水平陽(yáng)性率高,有較好的特異性及敏感性,可應(yīng)用于CML的早期、快速的輔助診斷。 2、PY20細(xì)胞陽(yáng)性率對(duì)CML分期、病情監(jiān)測(cè)及療效判斷有一定的臨床實(shí)用意義。 3、多色免疫熒光流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PY20細(xì)胞
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