內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓及其合并癥的關(guān)系.pdf

1、目的：基因多態(tài)和疾病的連鎖分析是目前研究多基因疾病分子生物學(xué)基礎(chǔ)的常用方法。原發(fā)性高血壓(essential hypertension，EH)及其常見(jiàn)心腦血管合并癥冠心病(coronary heart disease，CHD)和腦梗死(cerebral infarction，CI)均為多基因遺傳病，是環(huán)境因素與遺傳因素共同作用的結(jié)果，均與多種基因的多態(tài)性變異有關(guān)。血管局部一氧化氮(NO)是內(nèi)皮一氧化氮合成酶(endotheliumnit

2、rogen monoxide synthase，eNOS)以L-精氨酸為底物合成的。 NO生成后彌散進(jìn)入血管平滑肌細(xì)胞，激活腺苷酸環(huán)化酶引起血管平滑肌松弛，血管擴(kuò)張。eNOS是強(qiáng)有力的血管張力及周?chē)h(huán)阻力的調(diào)節(jié)因子。有研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓患者內(nèi)皮依賴(lài)的舒張功能受損，原發(fā)性高血壓患者在基礎(chǔ)狀態(tài)時(shí)全身NO生成減少。在eNOS基因敲除鼠發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈血壓升高，而過(guò)量表達(dá)eNOS的轉(zhuǎn)基因鼠，基礎(chǔ)收縮壓和舒張壓都有減低。以上提示eNOS基因的突變可

3、能導(dǎo)致NO合成的障礙，進(jìn)而引起血管阻力的增加，體循環(huán)血壓升高，參與人類(lèi)原發(fā)性高血壓的發(fā)生。目前關(guān)于eNOS基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓及冠心病和腦梗死的關(guān)系研究國(guó)內(nèi)外雖有報(bào)道，但在不同的國(guó)家、地區(qū)和種族間結(jié)果不一。為此，我們選取中國(guó)山東漢族人群進(jìn)行病例對(duì)照研究，以探討eNOS基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓及其合并癥冠心病和腦梗死的關(guān)系。 方法：選取山東地區(qū)原發(fā)性高血壓患者150例，高血壓合并腦梗死者130例，高血壓合并冠心病患者130例

4、及年齡、性別相匹配的正常對(duì)照組150例。所有入選者均排除繼發(fā)性高血壓、糖尿病、腎功能不全，山東籍漢族人并在山東居住十年以上。采血后測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，同時(shí)檢測(cè)基因型。采集入選者的臨床資料，包括身高、體重、是否吸煙及高血壓家族史。用標(biāo)準(zhǔn)方法從3ml全血中提取基因組DNA。使用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析確定eNOS基因多

5、態(tài)性，并對(duì)其一般生化指標(biāo)及一氧化氮合酶活性進(jìn)行測(cè)定比較。所有變量均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。所有統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，兩組間均數(shù)的比較采用單因素方差分析。使用Logistic回歸分析混雜因素如年齡、性別、吸煙、TC、TG、BMI及基因型對(duì)高血壓的影響。 結(jié)果：年齡、性別、吸煙、TC、TG、BMI等高血壓及其相關(guān)疾病的發(fā)病危險(xiǎn)因素在各病例組與對(duì)照組之間相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)

6、。一氧化氮合酶活性在高血壓組、腦梗死組和冠心病組，分別為35.0±2.3u/ml、34.6±2.6u/ml、34.4±2.9u/ml，顯著低于正常對(duì)照組的39.6±2.7u/m1(P<0.01)，各病例組之間無(wú)顯著性差異。血壓水平在各病例組顯著高于正常對(duì)照組，而病例組之間無(wú)顯著性差異。各組內(nèi)其正常純合子(基因型為GG)一氧化氮合酶活性均顯著高于雜合子和突變純合子(基因型為GT和TT)。eNOS基因型分布在各病例組和對(duì)照組均符合Hardy

7、-Weinbeig定律。高血壓組eNOS基因型(GT+TT)頻率及突變等位基因T頻率分別為31.3％和18.3％，顯著高于正常對(duì)照組的20.6％和11.0％(P<0.05)，兩頻率在腦梗死組為39.2％和23.5％，冠心病組為34.6％和20.8％，均較高血壓組的31.3％和18.3％為高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各亞組分析顯示，兩頻率在動(dòng)脈血栓形成性腦梗死組為33.3％和19.4％，穩(wěn)定性心絞痛組為32.6％和18.5％，陳舊性心肌梗死組為3

8、9.0％和25.6％，雖高于高血壓組的31.3％和18.3％，但差異無(wú)顯著性(P均>0.05)：腔隙性腦梗死組兩頻率分別為43.4％和26.3％，顯著高于高血壓組的31.3％和18.3％。多元非條件Logistic回歸分析結(jié)果顯示，突變等位基因T基因型(GT+TT)使正常人發(fā)生高血壓的相對(duì)危險(xiǎn)度Exp(β)為正常純合子者的2倍，使高血壓病人發(fā)生腔隙性腦梗死的相對(duì)危險(xiǎn)度為正常純合子者的1.8倍，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。而使高血壓

9、病人發(fā)生動(dòng)脈血栓形成性腦梗死、冠心病、穩(wěn)定性心絞痛和陳舊性心肌梗死的相對(duì)危險(xiǎn)度分別為1.2～1.1不等，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：內(nèi)皮一氧化氮合酶活性與遺傳有關(guān)，特別是與eNOS基因多態(tài)性有關(guān)，高血壓及其心血管合并癥的發(fā)生與一氧化氮合酶活性的遺傳性缺陷有關(guān)，eNOS基因第7外顯子G894T、多態(tài)性變異可能與山東地區(qū)漢族人原發(fā)性高血壓及其高血壓病人腔隙性腦梗死的發(fā)生有關(guān)．而與高血壓病人動(dòng)脈血栓形成性腦梗死、穩(wěn)定性心絞痛和陳舊性心肌梗