歸巢的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)梗死區(qū)血管再生的影響及活血化瘀方藥干預(yù)作用.pdf

1、　　目的：闡明活血化瘀方藥調(diào)控骨髓干細(xì)胞在梗死區(qū)分化的作用機(jī)制。
　　方法：選取清潔級(jí)( 200±10)gWistar大鼠 140只,雌雄各半,采用文獻(xiàn)公認(rèn)的方法建立大鼠 AMI模型,術(shù)后 24h存活的大鼠隨機(jī)分為：模型組、中藥組、西藥組、中西藥組、假手術(shù)組。除假手術(shù)組外,各組又根據(jù)術(shù)后 1d、7d、14d分為 3個(gè)亞組,即：模型組(模型組 1d、模型組 7d、模型組 14d)；中藥組(中藥組 1d、中藥組 7d、中藥組 14

2、d)；西藥組(西藥組 1d、西藥組 7d、西藥組 14d)；中西藥組(中西藥組 1d、中西藥組 7d、中西藥組 14d)；分組后立即給藥,西藥組皮下注射 G-CSF 50u g.kg-1.d-1；假手術(shù)組和模型組皮下注射生理鹽水 50u g.kg-1.d-1；中藥組腹腔注射血塞通注射液 150mg.kg-1.d-1；中西藥組皮下注射 G-CSF50 u g.kg-1.d-1和腹腔注射血塞通注射液 150mg.kg-1.d-1,其中 G-

3、CSF每天一次,連用 7天,血塞通注射液每天一次,直到處死大鼠前停止,在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)每亞組保證有7 只存活大鼠供實(shí)驗(yàn)用。采用免疫組化法檢測(cè) AMI 邊緣區(qū) C-kit 十細(xì)胞和 Ki-67 十細(xì)胞數(shù)、AMI邊緣區(qū) VEGF及 bFGF蛋白表達(dá)的情況。
　　結(jié)果：
　　①AMI 邊緣區(qū) C-kit 十細(xì)胞數(shù)的影響：C-kit 十細(xì)胞的陽(yáng)性染色于鏡下呈黃褐色,主要表達(dá)于 AMI 邊緣區(qū),梗死區(qū)表達(dá)強(qiáng)度較低。假手術(shù)組未見(jiàn) C

4、-kit 十細(xì)胞表達(dá), 24h 后各組在 AMI 邊緣區(qū)可偶見(jiàn) C-kit 十細(xì)胞表達(dá),但不明顯。7d 后中西藥組 C-kit 十細(xì)胞數(shù)較多,西醫(yī)組相對(duì)較少,模型組可偶見(jiàn) C-kit 十細(xì)胞出現(xiàn)；14天時(shí)各組較同組 7d時(shí)明顯減少,可能由于細(xì)胞分化,其表面 C-kit抗原減弱所致。
　　②AMI邊緣區(qū) Ki-67+細(xì)胞數(shù)的影響：假手術(shù)組未見(jiàn) Ki-67 十細(xì)胞, 24h后各組在 AMI邊緣區(qū)偶見(jiàn) Ki-67 十細(xì)胞,但不明顯。

5、7d后中西藥組 Ki-67 十細(xì)胞最多,西醫(yī)組較少,模型組偶見(jiàn) Ki-67 十細(xì)胞出現(xiàn)；14d時(shí)各組 Ki-67 十細(xì)胞數(shù)較同組 7d明顯減少。
　?、跘MI 邊緣區(qū) VEGF、bFGF 蛋白表達(dá)的影響： VEGF、bFGF 的陽(yáng)性染色鏡下多見(jiàn) AMI邊緣區(qū),梗死區(qū)表達(dá)強(qiáng)度不顯著。假手術(shù)組可見(jiàn)少量弱陽(yáng)性表達(dá),呈不規(guī)則黃褐色點(diǎn)狀物；模型組明顯多于假手術(shù)組,中西藥組可見(jiàn)大量陽(yáng)性表達(dá)。但 VEGF、bFGF 與 C-kit 十細(xì)胞染