轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達及多態(tài)性與乳腺癌關(guān)系的實驗研究.pdf

1、人類基因組研究計劃的研究成果提示基因內(nèi)部存在大量的多態(tài)性（polymorphism），這些多態(tài)性廣泛影響著人類生理機能以及多種疾病和腫瘤的發(fā)生，對疾病及腫瘤基因多態(tài)性的研究已經(jīng)成為功能基因組時代生物醫(yī)學領(lǐng)域又一焦點?；蚨鄳B(tài)性是指DNA序列中自然存在的多種變異形式：如單核苷酸置換，單個或者多個堿基的丟失或插入，堿基重復序列數(shù)目的改變和染色體結(jié)構(gòu)的改變。在基因多態(tài)性研究當中，一般將群體常見的DNA序列稱之為野生型（wild-type）等位

2、基因，將少見的DNA序列稱之為變異型（variant-type）等位基因?；蚨鄳B(tài)性可存在于人類基因組的任何區(qū)域，位于內(nèi)含子區(qū)域的基因多態(tài)性不影響轉(zhuǎn)錄，對蛋白的結(jié)構(gòu)和功能也不造成影響；位于基因啟動子和調(diào)控區(qū)域的多態(tài)性基因可能影響到基因的轉(zhuǎn)錄水平，而位于外顯子內(nèi)的基因多態(tài)性則直接影響到蛋白質(zhì)的編碼和功能。 隨著我國生活水平的提高以及生活和飲食方式的逐漸改變，女性乳腺癌發(fā)病率呈現(xiàn)明顯上升趨勢。據(jù)上海市疾病控制中心新近惡性腫瘤統(tǒng)計資料

3、顯示，上海地區(qū)乳腺癌發(fā)病率與死亡率均居女性常見惡性腫瘤的第一位。 目的： 本研究以檢測乳腺癌組織轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達，探討乳腺癌中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達與臨床分期、病理組織學分級及其預后等參數(shù)的關(guān)系；并從基因多態(tài)性水平測定乳腺癌組織中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4基因多態(tài)性的改變，探討其在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法： 上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院普通外科手術(shù)切除的乳腺癌病例，有完整的臨床病理資料共65

4、例,以鼠抗人E2F-4單克隆抗體為一抗檢測其在乳腺癌組織中的表達情況，以此評估其在乳腺癌發(fā)展中的作用。應用多聚酶鏈式反應（PCR）擴增后采用直接測序的方法，檢測乳腺癌組織中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4基因多態(tài)性的變化。 結(jié)果： 1. 研究組乳腺癌組織中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達顯著高于對照組，差異有顯著性（P＜0.05）；E2F-4的表達與淋巴轉(zhuǎn)移、TNM臨床分期、組織學分級以及預后在統(tǒng)計學上顯著相關(guān)（P均＜0.05）；乳腺癌的病理

5、學類型也與E2F-4的表達有關(guān)，導管癌和粘液癌的表達強于小葉癌及髓樣癌（P＜0.05）；術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移復發(fā)者E2F-4表達強度高于術(shù)后長期無轉(zhuǎn)移復發(fā)者（P＜0.05）；但與年齡、大小、ER、PR和c-erb-B2無統(tǒng)計學意義的顯著相關(guān)性（P＞0.05）； 2. 乳腺癌E2F－4基因（AGC）多態(tài)性變異與正常人群有差異（P＜0.05）,20例乳腺癌與配對癌旁組織(AGC)重復數(shù)均相同，未發(fā)現(xiàn)腫瘤組織存在（AGC）n數(shù)目改變的體細胞突

6、變（somatic mutation）。 結(jié)論： 1. 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的功能涉及細胞的增值、分化、凋亡，其轉(zhuǎn)錄活性的增強有利于促進腫瘤細胞的增值與分化并導致患者較差的預后，故轉(zhuǎn)錄因子E2F-4對于判斷患者的預后具有重要的價值，其可能是評判乳腺癌惡性程度、轉(zhuǎn)移復發(fā)和預后的較好指標； 2. 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4作為腫瘤的相關(guān)基因，在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著癌基因的作用，而不是抑癌基因的表現(xiàn)。 3. 轉(zhuǎn)錄因子