酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其改構(gòu)體對(duì)急性腎損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：急性腎損傷是臨床上十分常見(jiàn)的病癥，死亡率較高，而目前的治療手段仍停留在支持療法即“治標(biāo)”的水平。缺血再灌注損傷及藥物中毒(如氨基糖苷類抗生素腎中毒)引起的急性腎損傷是導(dǎo)致急性腎功能衰竭(Acute Renal Failure，ARF)的常見(jiàn)病因，其病理特征主要表現(xiàn)為近端小管和髓袢升支粗段的上皮細(xì)胞損傷。因此加快損傷腎小管的恢復(fù)和再生是治療ARF的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕牵?、探索aFGF和MaFGF對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及

2、其機(jī)制。2、研究MaFGF對(duì)由慶大霉素引起的體外培養(yǎng)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法： 1．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：健康雄性wistar大白鼠48只，隨機(jī)分為6組，即假手術(shù)組、模型組、高低aFGF劑量組(濃度分別為16μg/kg、8μg/kg)和高低MaFGF高劑量組(濃度分別為16μg/kg、8μg/kg)，每組8只。建立雙側(cè)腎缺血再灌注損傷模型，24 h后取血液和腎標(biāo)本。觀察血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)

3、，丙二醛(MDA)的含量變化及腎組織中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(N0)、谷光甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、MDA的含量和腎組織的病理變化。提取腎組織中DNA通過(guò)凝膠電泳觀察細(xì)胞凋亡情況。 2．體外實(shí)驗(yàn)：通過(guò)酶消化法獲取腎小管上皮細(xì)胞，接種于96孔培養(yǎng)板：(1)在培養(yǎng)液中加入一系列濃度的MaFGF，培養(yǎng)72 h后用WST-8法檢測(cè)細(xì)胞的活力。(2)培養(yǎng)72 h后加入一系列濃度的慶大霉素(GM)，實(shí)驗(yàn)組在GM作用12h后

4、加入不同濃度MaFGF，再培養(yǎng)48 h后用WST-8法檢測(cè)細(xì)胞存活率。 (3)以GM建立損傷模型，并在加藥后12 h加入一定量的MaFGF，觀察MaFGF對(duì)GM損傷的腎小管細(xì)胞的保護(hù)作用。 結(jié)果： 1．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：aFGF和MaFGF組與模型組比較，各生化和血清學(xué)指標(biāo)差異均有顯著性(P<0.01或0.05)，血清中BUN、Scr、MDA含量和組織中MDA、NO含量均降低，SOD、CAT活性增強(qiáng)。腎組織光鏡顯示aFG

5、F和MaFGF能明顯減輕腎組織水腫、腎小管擴(kuò)張和破壞，電鏡下見(jiàn)腎小管上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)(微絨毛、線粒體和溶酶體等)損傷較輕或基本正常。細(xì)胞DNA電泳顯示模型組DNA呈現(xiàn)彌散狀，出現(xiàn)典型壞死條帶；而aFGF和MaFGF組DNA均沒(méi)有明顯的彌散狀態(tài)，而呈現(xiàn)一條正常組織DNA帶。 2．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：(1)MaFGF對(duì)腎小管上皮細(xì)胞有一定的增殖作用。(2)MaFGF能使GM對(duì)腎小管上皮細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)升高。(3)GM組與對(duì)照組比

6、較，各生化和酶學(xué)指標(biāo)差異均有顯著性(P<0.01或0.05)；MaFGF+GM組與GM組比較，各生化和酶學(xué)指標(biāo)差異均有顯著性(P<0.01或0.05)；而MaFGF+GM組與對(duì)照組比較，NO含量差異無(wú)顯著性(P>0.05)，MDA、SOD、GSH-Px差異仍有顯著性(P<0.01或0.05)。 結(jié)論：aFGF及其MaFGF能減輕腎缺血再灌注和慶大霉素所致?lián)p傷，對(duì)腎小管上皮細(xì)胞有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其直接或間接拮抗自由基的產(chǎn)生，