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文檔簡介
1、目的:
通過對(duì)小鼠過敏性鼻炎模型鼻粘膜中ILC2細(xì)胞及其相關(guān)的細(xì)胞表面分子轉(zhuǎn)錄因子的檢測(cè),觀察ILC2細(xì)胞在過敏性鼻炎動(dòng)物模型鼻粘膜中是否表達(dá)以及探究其在過敏性鼻炎發(fā)病機(jī)制中起的作用,以便于為過敏性鼻炎的治療提供一個(gè)新的靶點(diǎn)。
方法:
BALB/c小鼠40只,雌性,SPF級(jí),鼠齡6周,體重10-15g,隨機(jī)分為4組:Control組、OVA+SR1001組、OVA組、OVA+IL-25+IL-33組。卵清蛋
2、白(Ovalbumin,OVA)作為致敏劑,氫氧化鋁作為佐劑,采用腹腔注射聯(lián)合鼻腔滴注的方法建立過敏性鼻炎小鼠模型。對(duì)于OVA+SR1001組、OVA+IL-25+IL-33組小鼠,從第22天至29天鼻腔激發(fā)前2小時(shí)事先鼻腔滴注SR1001溶液或IL-25/IL-33溶液,其余致敏方法一致。免疫熒光雙染技術(shù)檢測(cè)各組動(dòng)物鼻粘膜中ILC2細(xì)胞的表達(dá),實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)各組動(dòng)物鼻粘膜中ILC2細(xì)胞相關(guān)因子RORα、Thy-1、ST2、CD
3、90、CD117、CD127和Ly6a的基因表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)檢測(cè)各組動(dòng)物血清中IgE、IL-4、IL-5和IL-13的表達(dá)水平。
結(jié)果:
Control組、OVA+SR1001組、OVA組三組動(dòng)物中免疫熒光雙染ILC2細(xì)胞數(shù)目依次增加,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但是OVA+IL-25+IL-33組與OVA+SR1001組、OVA組相比結(jié)果無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
RT-PCR檢測(cè)四組動(dòng)物中RORα、Thy-1、
4、ST2、CD90、CD117、CD127和Ly6a的基因表達(dá)水平,結(jié)果顯示RORα、Thy-1、ST2、CD90、CD117指標(biāo)表達(dá)水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而CD127和Ly6a未檢測(cè)到明顯表達(dá)差異。
Control組、OVA+SR1001組和OVA組小鼠血清中IgE水平依次升高,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,OVA+IL-25+IL-33組小鼠血清IgE水平高于OVA組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。OVA+SR1001組、OVA組和OVA+IL-25+IL
5、-33組動(dòng)物血清IL-4和IL-5水平高于Control組,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但是三組之間無明顯差異。動(dòng)物血清IL-13水平在Control組、OVA+SR1001組、OVA組、OVA+IL-25+IL-33組依次升高,且結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論:
1、Control組、OVA+SR1001組和OVA組小鼠血清中IgE水平依次升高,ILC2細(xì)胞數(shù)目同樣依次增加,提示ILC2細(xì)胞參與過敏性鼻炎的發(fā)病過程,且ILC2細(xì)胞
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