TLR2-STAT3通路在過敏性炎癥發(fā)病機制的作用研究.pdf

1、目的：建立小鼠致敏模型，通過觀察TLR2基因敲除小鼠肺組織STAT3表達及炎癥指標的改變，探討TLR2-STAT3通路在過敏性炎癥發(fā)病機制中的作用。
　　方法：
　　1.實驗小鼠分為四組，每組5只，C57Bl/6OVA組及TLR2-/-OVA組小鼠在第0天和第7天分別腹腔注射OVA致敏液建立致敏模型，C57Bl/6NS組及TLR2-/-NS組予生理鹽水腹腔注射建立對照模型，注射部位、時間及劑量均與前兩組相同。
　　2.

2、HE染色觀察肺組織細支氣管周圍炎癥細胞浸潤情況，肺泡灌洗液細胞分類計數(shù)觀察各類炎癥細胞的變化。
　　3.采用ELISA檢測外周血中MouseOVA-IgE，IgA，IgM，IgG1，IgG2a及IgG2b表達水平。
　　4.采用Real-TimePCR檢測肺組織中IL-4、IL-5及IL-13mRNA表達水平。
　　5.分別采用免疫組化及免疫熒光方法檢測肺組織中STAT3及NF-κB的蛋白表達水平。
　　6.C5

3、7Bl/6小鼠致敏前腹腔注射CPT，劑量為200mg/kg/d，觀察CPT對致敏小鼠STAT3、NF-κB及IgG1表達及肺組織炎癥細胞浸潤的影響。
　　結(jié)果：
　　1.采用卵白蛋白腹腔注射成功建立了小鼠致敏模型，C57Bl/6小鼠致敏后氣道周圍炎癥細胞浸潤明顯，肺泡灌洗液中巨噬細胞比例下降，嗜酸性粒細胞比例上升，肺組織中IL-4及IL-13mRNA表達明顯上調(diào)，血清IgG1、IgA、IgG2a、IgG2b、IgM及IgE表

4、達均明顯上升，以上差異均有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。
　　2.TLR2-/-OVA小鼠與C57Bl/6OVA小鼠相比，氣管及細支氣管周圍炎癥細胞浸潤減輕，肺組織中IL-4mRNA及IL-13mRNA表達水平下調(diào)，外周血MouseOVA-IgE表達水平上升，IgG1表達水平下降，肺組織中STAT3蛋白表達下調(diào)，以上差異均有統(tǒng)計學意義（p＜0.05），而NF-κB的表達無改變。
　　3.CPT干預(yù)后致敏小鼠肺組織中STAT3蛋