體外構(gòu)建的工程化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)心肌組織生存研究.pdf

1、目的：1.探索骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs)移植到聚乙交酯-聚己內(nèi)酯共聚物(Poly(glycolic acid)/Poly(e-Caprolactone)Co-polymer，PGCL)支架上構(gòu)建BMMSCs-PGCL補(bǔ)片的可行性。
　　 2.觀察體外構(gòu)建BMMSCs-PGCL補(bǔ)片在正常心肌組織和梗死后心肌組織生長(zhǎng)情況。
　　 方法：雌性Sprag

2、ue-Dawley(SD)大鼠(體重250g-300g)的BMMSCs采用貼壁分離篩選法進(jìn)行分離、培養(yǎng)，選取第三代進(jìn)行體外4'，6-二脒基-2-苯基吲哚(4'，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI)標(biāo)記。制作BMMSCs懸液(2×106個(gè)/cm2)種植于PGCL上形成BMMSCs-PGCL補(bǔ)片。培養(yǎng)48小時(shí)，在電鏡下觀察；H&E染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察。選擇雌性SD大鼠(體重250g-300g)，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈

3、前降支制作心肌梗死(Myocardial infarction，MI)模型。把BMMSCs-PGCL補(bǔ)片植入到正常心肌組織和梗死后心肌組織培養(yǎng)4周。4周后取上述組織通過(guò)組織病理學(xué)檢查，了解BMMSCs在PGCL支架上存活情況。
　　 結(jié)果：1.原代培養(yǎng)結(jié)果通過(guò)上述方法培養(yǎng)的BMMSCs貼壁生長(zhǎng)，形狀為梭形，呈漩渦狀排列。
　　 2.體外構(gòu)建的BMMSCs-PGCL補(bǔ)片分別在光學(xué)顯微鏡和電鏡下觀察結(jié)果：BMMSCs在PGC

4、L支架中呈三維生長(zhǎng)，細(xì)胞與支架黏附良好。
　　 3.BMMSCs-PGCL補(bǔ)片植入正常心肌組織的觀察結(jié)果：在激光共聚焦顯微鏡下，對(duì)比觀察移植后1周和第5周切片顯示：同第1周相比，第5周的心肌組織內(nèi)出現(xiàn)DAPI標(biāo)記的BMMSCs。
　　 4.BMMSCs-PGCL補(bǔ)片植入梗死后心肌組織觀察結(jié)果：在激光共聚焦顯微鏡下：梗死區(qū)出現(xiàn)DAPI標(biāo)記的BMMSCs。H&E染色圖片所示：梗死區(qū)出現(xiàn)BMMSCs。
　　 結(jié)論：1.