miR-34c在快速老化小鼠海馬組織中的表達(dá)及其靶基因的初步鑒定.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則研究生簽名哥。影導(dǎo)師簽移加院領(lǐng)廠知f。河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)

2、行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生答轢／子美彩)C、導(dǎo)師簽章汐矽么痧／，7伽磚礴7鼉中文摘要miR34c在快速老化鼠海馬組織中的表達(dá)及其靶基因的初步鑒定摘要目的：阿爾茨海默癥(Alzheimer’SDisease，AD)’是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的一種神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為漸進(jìn)性記憶障礙、認(rèn)知功能障

3、礙、人格改變及語言障礙等神經(jīng)精神癥狀，嚴(yán)重影響社會(huì)交往、就業(yè)與生活質(zhì)量，給個(gè)人、家庭和社會(huì)帶來沉重負(fù)擔(dān)。AD的病因和發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，至今尚不完全清楚。目前存在多種學(xué)說，如氧化應(yīng)激學(xué)說、Ap級(jí)聯(lián)學(xué)說、Tau蛋白假說、線粒體功能障礙學(xué)說、基因突變學(xué)說和自噬功能失調(diào)學(xué)說等。miRNAs是體內(nèi)重要的一種內(nèi)源性非編碼d、RNA，通過與mRNA3UTR結(jié)合發(fā)揮轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)作用，在人體大約有2030％的基因是受miRNA調(diào)控的。近年來，研究表明，mi

4、R18b、miR325、miR615等多個(gè)miRNAs在AD的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮的重要調(diào)節(jié)作用。盡管如此，失調(diào)的miRNAs在AD發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尚不完全明確，是當(dāng)前本領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問題。本研究通過對(duì)快速老化小鼠(SenescenceAcceleratedMouse—Prone／8，SAMP8)海馬組織中miRNAs的表達(dá)譜進(jìn)行分析，結(jié)合生物信息學(xué)、RealtimePCR和Westernblot等方法，篩選并確定目標(biāo)miRNAs及

5、其靶基因，進(jìn)一步采用熒光素酶實(shí)驗(yàn)觀察miR34c對(duì)其靶基因突觸結(jié)合蛋白(Synaptotagmin1，sytl)的負(fù)向調(diào)控作用。為闡明miR一34c在AD發(fā)生發(fā)展過程中的作用以及開發(fā)以miRNAs為靶點(diǎn)的藥物提供了新的思路。方法：①法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：封閉群清潔級(jí)快速老化亞系SAMP8及抗快速老化亞系SAMRl(SenescenceacceleratedMouseResistant／1，SAMRl)。②②SaMRn表達(dá)譜的檢測(cè)：采用miRNA基

6、因芯片技術(shù)檢測(cè)S腳8和正常同齡對(duì)照SAMRl鼠海馬組織中miRNA表達(dá)譜的改變情況。⑧③利用生物信息學(xué)方法進(jìn)行KEGG分析，預(yù)測(cè)差異性表達(dá)的miRNAs可能參與的信號(hào)通路。④能差異性表達(dá)miRNA的驗(yàn)證：通過RealtimePCR驗(yàn)證目標(biāo)miRNAmiR34c在3月齡SAMP8矛n同齡對(duì)照SAMRl小鼠海馬組織中的表達(dá)；進(jìn)一步通過Real—timePCR坳J]miR34c在3月齡SAMRld、鼠腦、心、肝、腎等組織的表達(dá)和3，6矛t]9