miR-222在結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116中的表達及其靶基因c-Fos的鑒定.pdf

1、同等學(xué)力人員碩士學(xué)位論文論文題目miR222在結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116中的表達及其靶基因cFos的鑒定研究生姓名李吉指導(dǎo)教師姓名王龍專業(yè)名稱消化內(nèi)科研究方向結(jié)直腸癌的基礎(chǔ)與臨床研究論文提交日期2013年5月miR222在結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116中的表達及其靶基因cFos的鑒定中文摘要ImiR222在結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116中的表達及其靶基因cFos的鑒定中文摘要目的分析及檢測miR222在結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116中的表達水平及其

2、功能，對其靶基因cFos進行鑒定，探討miR222在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中可能的分子機制。方法本課題選取了結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116進行體外培養(yǎng)，采用RTPCR方法檢測miR222在HCT116細(xì)胞以及正常結(jié)腸上皮細(xì)胞中的表達，并用WesternBlot檢測cFos蛋白。進一步用miR222模擬物和抑制物轉(zhuǎn)染HCT116細(xì)胞，通過CCK8介導(dǎo)的化學(xué)顏色反應(yīng)分析方法評價細(xì)胞的增殖情況，用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞的DNA含量，通過分析subG1亞

3、群細(xì)胞的百分比判斷細(xì)胞的凋亡情況，用Westernblot方法觀察轉(zhuǎn)染miR222模擬物和抑制物后HCT116細(xì)胞中cFos蛋白水平的變化情況。結(jié)果1、與人正常結(jié)直腸黏膜上皮細(xì)胞相比，結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116細(xì)胞中miR222的表達量顯著上調(diào)1.82倍，p0.01；2、與人正常結(jié)直腸黏膜上皮細(xì)胞相比，結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116細(xì)胞中cFOS的表達水平顯著低于正常結(jié)腸上皮細(xì)胞(1.510.2185vs0.690.0918p0.01)。3

4、、結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116轉(zhuǎn)染miR222抑制物后，顯著的抑制了HCT116細(xì)胞的增殖并促進HCT116細(xì)胞的凋亡（24h時p0.05，48h時p0.01）；4、在結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116中轉(zhuǎn)染miR222模擬物可以抑制cFOS表達(1.250.1336vs0.940.0895p0.05），轉(zhuǎn)染miR222抑制物則可以顯著上調(diào)cFOS表達(0.920.0909vs1.310.1028p0.01）。結(jié)論本研究初步揭示了miR222在結(jié)