RhD初篩試驗(yàn)陰性孕婦血清學(xué)表型與基因型分析.pdf

1、我們用單克隆IgM抗D抗體對22361例孕婦進(jìn)行了RhD抗原初篩，發(fā)現(xiàn)Rh陰性血型個體為128例，占5.72‰。進(jìn)一步用間接抗球蛋白試驗(yàn)檢測，發(fā)現(xiàn)其中3例陽性。
　　產(chǎn)生抗D抗體是Rh陰性血型孕婦發(fā)生新生兒溶血癥的先兆。我們對這128例孕婦做了不規(guī)則抗體篩查和抗D抗體監(jiān)測，2例不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)陽性，為抗-D抗體。其中1例G2P1孕婦初診不規(guī)則抗體篩選為陰性，孕22周左右行羊水穿刺術(shù)并注射抗D免疫球蛋白，但孕中仍產(chǎn)生了抗D，且抗D

2、效價隨孕期增強(qiáng)，雖經(jīng)注射丙種球蛋白治療，但新生兒嚴(yán)重黃疸，發(fā)生了RHD溶血癥。另1例G1P0孕婦，初診不規(guī)則抗體篩選為陰性，孕末發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體為陽性，抗體鑒定為抗D抗體，未發(fā)生新生兒溶血病。
　　125例間接抗球蛋白試驗(yàn)陰性樣本包含RHD基因D抗原完全缺失的D抗原陰性個體和D抗原表達(dá)極弱的DEL個體。用PCR-SSP和測序進(jìn)行基因分型，結(jié)果為RHD基因D抗原完全缺失104例，DEL21例。3例間接抗球蛋白試驗(yàn)檢測為陽性的個體包含弱

3、D和部分D，經(jīng)PCR-SSP和測序進(jìn)行基因分型，弱D2例:為D15型;部分D1例，為DⅥtypeⅢ型。在全部128例Rh陰性血型樣本中，D抗原陰性比例為81.25％，DEL為16.4％，D15為1.56％，DⅥtypeⅢ為0.78％。據(jù)文獻(xiàn)報道，在中國漢族Rh陰性血型人群中D抗原陰性占大多數(shù)，在D抗原變異型中以DEL為主，在弱D中以D15為主，在部分D中以DⅥtypeⅢ為主。我們的結(jié)果與文獻(xiàn)報道基本一致。
　　2例產(chǎn)生同種免疫的個

4、體，基因型均為RHD基因D抗原完全缺失，其中1例發(fā)生了新生兒溶血癥。在血清學(xué)分析時，D抗原陰性和DEL需用吸收-放散實(shí)驗(yàn)區(qū)別。DEL是由于RhD胞內(nèi)區(qū)發(fā)生突變，影響RhD整合到紅細(xì)胞膜上，導(dǎo)致在紅細(xì)胞膜上拷貝數(shù)降低，但胞外區(qū)沒變，具有完整的D抗原表位，與D抗原陰性具有質(zhì)的區(qū)別。由于用吸收-放散實(shí)驗(yàn)鑒定DEL時假陰性率較高，因此用基因分型方法對D抗原陰性和DEL加以區(qū)分極其重要。
　　在中國漢族人群中，弱D以15為主，部分D以DⅥt

5、ypeⅢ為主，兩者均具有發(fā)生同種免疫風(fēng)險;此外，弱D和部分D還有其它亞型。不同亞型臨床效應(yīng)各不相同，應(yīng)將血清學(xué)表型和基因型相結(jié)合，對Rh陰性血型個體作風(fēng)險評估。
　　目前我國臨床上通常用血清學(xué)方法鑒定孕產(chǎn)婦Rh血型，對Rh陰性血型孕婦進(jìn)行D抗原陰性、部分D、弱D和DEL表型分類，結(jié)合抗D檢測，以預(yù)防Rh陰性血型孕婦發(fā)生新生兒溶血癥。但血清學(xué)方法存在一定局限性，一方面難以區(qū)分部分D、弱D和DEL各型內(nèi)變異，而部分D、弱D和DEL的不