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1、我們用單克隆IgM抗D抗體對(duì)22361例孕婦進(jìn)行了RhD抗原初篩,發(fā)現(xiàn)Rh陰性血型個(gè)體為128例,占5.72‰。進(jìn)一步用間接抗球蛋白試驗(yàn)檢測(cè),發(fā)現(xiàn)其中3例陽(yáng)性。
產(chǎn)生抗D抗體是Rh陰性血型孕婦發(fā)生新生兒溶血癥的先兆。我們對(duì)這128例孕婦做了不規(guī)則抗體篩查和抗D抗體監(jiān)測(cè),2例不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)陽(yáng)性,為抗-D抗體。其中1例G2P1孕婦初診不規(guī)則抗體篩選為陰性,孕22周左右行羊水穿刺術(shù)并注射抗D免疫球蛋白,但孕中仍產(chǎn)生了抗D,且抗D
2、效價(jià)隨孕期增強(qiáng),雖經(jīng)注射丙種球蛋白治療,但新生兒嚴(yán)重黃疸,發(fā)生了RHD溶血癥。另1例G1P0孕婦,初診不規(guī)則抗體篩選為陰性,孕末發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體為陽(yáng)性,抗體鑒定為抗D抗體,未發(fā)生新生兒溶血病。
125例間接抗球蛋白試驗(yàn)陰性樣本包含RHD基因D抗原完全缺失的D抗原陰性個(gè)體和D抗原表達(dá)極弱的DEL個(gè)體。用PCR-SSP和測(cè)序進(jìn)行基因分型,結(jié)果為RHD基因D抗原完全缺失104例,DEL21例。3例間接抗球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)為陽(yáng)性的個(gè)體包含弱
3、D和部分D,經(jīng)PCR-SSP和測(cè)序進(jìn)行基因分型,弱D2例:為D15型;部分D1例,為DⅥtypeⅢ型。在全部128例Rh陰性血型樣本中,D抗原陰性比例為81.25%,DEL為16.4%,D15為1.56%,DⅥtypeⅢ為0.78%。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,在中國(guó)漢族Rh陰性血型人群中D抗原陰性占大多數(shù),在D抗原變異型中以DEL為主,在弱D中以D15為主,在部分D中以DⅥtypeⅢ為主。我們的結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。
2例產(chǎn)生同種免疫的個(gè)
4、體,基因型均為RHD基因D抗原完全缺失,其中1例發(fā)生了新生兒溶血癥。在血清學(xué)分析時(shí),D抗原陰性和DEL需用吸收-放散實(shí)驗(yàn)區(qū)別。DEL是由于RhD胞內(nèi)區(qū)發(fā)生突變,影響RhD整合到紅細(xì)胞膜上,導(dǎo)致在紅細(xì)胞膜上拷貝數(shù)降低,但胞外區(qū)沒(méi)變,具有完整的D抗原表位,與D抗原陰性具有質(zhì)的區(qū)別。由于用吸收-放散實(shí)驗(yàn)鑒定DEL時(shí)假陰性率較高,因此用基因分型方法對(duì)D抗原陰性和DEL加以區(qū)分極其重要。
在中國(guó)漢族人群中,弱D以15為主,部分D以DⅥt
5、ypeⅢ為主,兩者均具有發(fā)生同種免疫風(fēng)險(xiǎn);此外,弱D和部分D還有其它亞型。不同亞型臨床效應(yīng)各不相同,應(yīng)將血清學(xué)表型和基因型相結(jié)合,對(duì)Rh陰性血型個(gè)體作風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。
目前我國(guó)臨床上通常用血清學(xué)方法鑒定孕產(chǎn)婦Rh血型,對(duì)Rh陰性血型孕婦進(jìn)行D抗原陰性、部分D、弱D和DEL表型分類,結(jié)合抗D檢測(cè),以預(yù)防Rh陰性血型孕婦發(fā)生新生兒溶血癥。但血清學(xué)方法存在一定局限性,一方面難以區(qū)分部分D、弱D和DEL各型內(nèi)變異,而部分D、弱D和DEL的不
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