鹽霉素選擇性靶向結(jié)直腸癌細胞的干細胞亞群并誘導間充質(zhì)上皮性轉(zhuǎn)換.pdf

1、目的：研究鹽霉素對結(jié)直腸癌(CRC)中癌癥干細胞(CSCs)的影響并初步探討其作用機制。
　　 方法：(1)體外鹽霉素與奧沙利鉑處理人類CRC細胞系H129和SW480，不同藥物處理后，細胞計數(shù)試劑盒8(CCK8)確定CRC細胞的存活性，并針對不同的藥物對細胞的作用繪制劑量反應曲線；
　　 (2)鹽霉素與奧沙利鉑處理CRC細胞后，流式細胞術(shù)定量性分析CD133+細胞亞群比例，并進一步用軟瓊脂檢測功能性分析CRC細胞的克隆

2、球形成能力；
　　 (3)鹽霉素與奧沙利鉑處理CRC細胞后，transwell檢測分析CRC細胞的遷移及侵襲能力；
　　 (4)鹽霉素與奧沙利鉑處理CRC細胞后，采用Westernblot分析，免疫熒光染色，及real-time PCR分析，分別定性、定位、定量性檢測CRC細胞中上皮間充質(zhì)性轉(zhuǎn)換(EMT)的上皮性標志物E-cadherin和間充質(zhì)性標志物Vimentin的表達情況。
　　 結(jié)果：(1)相對于奧沙利

3、鉑，鹽霉素對人類CRC細胞H129和SW480顯示出更強的細胞毒性作用(IC50處比較，P<0.05)；
　　 (2)與奧沙利鉑相反，鹽霉素顯著性的降低了CD133+細胞亞群的比例(P<0.05)；并降低了CRC細胞的克隆球形成能力(P<0.05)；
　　 (3)與奧沙利鉑相反，鹽霉素顯著性的降低了CRC細胞的遷移和侵襲能力(P<0.05)；
　　 (4)與奧沙利鉑不同，鹽霉素顯著性的上調(diào)了MET的上皮性標志物E