縫隙連接開放劑對(duì)藥物獲得性QT間期異常性疾病室性心律失常的影響.pdf

1、室性心律失常是臨床上心血管病人最常見的猝死原因之一。但是室性心律失常的病因十分復(fù)雜，上世紀(jì)80年代末的CAST 實(shí)驗(yàn)讓人們認(rèn)識(shí)到由藥物導(dǎo)致的心律失常的重要性。許多藥物都可以影響心肌細(xì)胞的除極和復(fù)極，進(jìn)而導(dǎo)致心電圖上QT 間期的異常，從而導(dǎo)致室性心律失常。在藥物獲得性心律失常中，由QT 間期延長(zhǎng)而導(dǎo)致的尖端扭轉(zhuǎn)性室速是人們認(rèn)識(shí)最為全面的心律失常之一。但是除了QT 間期延長(zhǎng)，QT 間期縮短也是心律失常又一獨(dú)立危險(xiǎn)指標(biāo)。隨著人們對(duì)短QT 綜合

2、征的認(rèn)識(shí)的近一步深入，發(fā)現(xiàn)QT 間期縮短所也可以導(dǎo)致心律失常。
　　 國(guó)際組織和我國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局都明確規(guī)定新發(fā)明的藥物在研發(fā)階段都必須通過QT 間期的測(cè)試和是否有致心律失常作用的檢驗(yàn)。但是僅僅因?yàn)樗幬锏闹滦穆墒СＷ饔枚鴮⑵渫耸型挚上?。而且藥物?dǎo)致QT 間期異常和致心律失常作用十分普遍。對(duì)長(zhǎng)QT 綜合征和短QT 綜合征的研究表明：跨室壁復(fù)極離散度在其心律失常的發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用。既往的研究也表明：縫隙連接在跨

3、室壁復(fù)極離散中也起著重要的作用?？p隙連接是心肌細(xì)胞與心肌細(xì)胞之間的一類特殊的離子通道，他可以增加細(xì)胞間電和化學(xué)信號(hào)的傳導(dǎo)，可以平衡心肌細(xì)胞間電和化學(xué)不穩(wěn)定性?？剐穆墒Сｋ氖且环N特異性的縫隙連接開放劑，他在增加縫隙連接偶聯(lián)的同時(shí)對(duì)其他的特異性的離子通道沒有影響。設(shè)想在使用那些有致心律失常作用的高危藥物同時(shí)，聯(lián)合使用抗心律失常肽，是否可以抵消這些藥物的致心律失常作用?；诖?，本課題選用一種延長(zhǎng)QT 間期的藥物伊布利特，和一種縮短QT 間期的

4、藥物吡那地爾，利用楔形心肌塊模型，來探討預(yù)先灌流抗心律失常肽對(duì)其致心律失常作用的影響，進(jìn)而尋找有效的治療藥源性心律失常的方法，同時(shí)探討藥物導(dǎo)致的QT 間期異常所導(dǎo)致的心律失常的可能機(jī)制。我們研究表明：抗心律失常肽可以通過磷酸化縫隙連接蛋白CX43 來增加心肌細(xì)胞間的偶聯(lián)，進(jìn)而減少跨室壁復(fù)極離散度，從而抑制伊布利特在低鉀低鎂環(huán)境下致尖端扭轉(zhuǎn)性室性心動(dòng)過速的作用。但是對(duì)短QT 情況下的心律失常沒有抑制作用。
　　 第一部分 短QT

5、間期綜合征發(fā)生室性心律失常機(jī)制的探討
　　 目的：探討pinacidil（吡那地爾）建立的短QT 間期綜合征模型致室性心律失常的機(jī)制，并觀察縫隙連接激動(dòng)劑AAP10（抗心律失常肽）對(duì)該模型電生理參數(shù)的影響。
　　 方法：利用pinacidil 灌注家兔楔形心肌塊建立短QT 間期綜合征模型。將20只新西蘭長(zhǎng)耳白兔隨機(jī)分成pinacidil組和AAP10組，每組10只。Pinacidil組灌流10μmol/L的pinacid

6、il，AAP10組灌流AAP10 500nmol/l和pinacidil10μmol/L的混合液，同步記錄灌流前后內(nèi)外膜動(dòng)作電位和容積心電圖，觀察灌流前后QT 間期，TDR(跨室壁離散度)，程序性刺激觀察心肌組織不應(yīng)期和室性心律失常的誘發(fā)情況。
　　 結(jié)果：灌流pinacidil后，QT 間期從291±19ms 縮到232±19ms,TDR從44±12ms 減少到22±7ms，而不應(yīng)期從164±8ms 減少到112±14ms，室

7、性心律失常發(fā)生率從0/10 增加至8/10。AAP10組和pinacidil組的TDR、QT 間期、不應(yīng)期及室性心律失常的誘發(fā)率沒有顯著差別。
　　 結(jié)論：TDR 減小和不應(yīng)期的縮短可能是pinacidil 建立的短QT 間期模型致室性心律失常的基礎(chǔ)，抗心律失常肽對(duì)pinacidil 誘導(dǎo)的短QT 間期綜合征模型電不穩(wěn)定性沒有明顯影響。
　　 第二部分抗心律失常肽對(duì)低鉀低鎂條件下伊布利特致尖端扭轉(zhuǎn)性室性心動(dòng)過速的影響

8、r>　　 目的：探討縫隙連接開放劑抗心律失常肽（AAP10）對(duì)低鉀低鎂條件下伊布利特致尖端扭轉(zhuǎn)性室性心動(dòng)過速（TdP）及心肌電不穩(wěn)定性的影響，探討伊布利特發(fā)生TdP的可能機(jī)制以及探索有效的預(yù)防方法。
　　 方法：54只日本長(zhǎng)耳大白兔隨機(jī)制備成左室楔形心肌塊模型，隨機(jī)分為對(duì)照組、低鉀低鎂組、伊布利特灌流組、低鉀低鎂伊布利特組和AAP10 干預(yù)組。對(duì)照組灌流正常臺(tái)氏液，低鉀低鎂組灌流低鉀低鎂臺(tái)氏液，伊布利特組灌流濃度2mg/l的伊

9、布利特，低鉀低鎂伊布利特組灌流同濃度伊布利特的低鉀低鎂臺(tái)氏液，AAP10組給予AAP10 干預(yù)的條件后灌流溶有伊布利特的低鉀低鎂臺(tái)氏液，每組灌流時(shí)間均為1h40min。比較各組早后除極（EAD）、R on T 室性早搏和TdP的發(fā)生情況，以及QT 間期、T 波頂點(diǎn)到終點(diǎn)距離（Tp-e）和Tp-e/QT的變化。同時(shí)提取灌流結(jié)束后的心肌塊組織的蛋白，利用免疫印跡法檢測(cè)總體縫隙連接蛋白CX43的水平，和去磷酸化縫隙連接蛋白Cx43的水平。

10、r>　　 結(jié)果：與對(duì)照組比較，低鉀低鎂伊布利特組QT 間期、Tp-e和Tp-e/QT 延長(zhǎng)，EAD、R on T 室性早搏TdP的發(fā)生率明顯增多。AAP10 干預(yù)組，TdP、QT間期、Tp-e和Tp-e/QT 比低鉀低鎂伊布利特組顯著減少。與對(duì)照組比較各組總縫隙連接蛋白Cx43 沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。低鉀低鎂伊布利特組與對(duì)照組比較，去磷酸化的Cx43 水平明顯減少。與低鉀低鎂伊布利特組比較，AAP10組去磷酸化的Cx43水平明顯增多。