活動性肺結核病相關細胞因子及其DNA甲基化研究.pdf

1、肺結核病（pulmonary tuberculosis，PTB）是由結核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis，M.tb）引起的一種與機體細胞免疫應答密切相關的慢性感染性疾病。活化的T淋巴細胞及其分泌的細胞因子在感染和疾病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
　　為進一步了解活動性肺結核病相關細胞因子的變化，本課題檢測了肺結核病人和結核分枝桿菌潛伏感染者血漿中細胞因子表達水平的差異，并且隨訪觀察了肺結核病人密切接觸者

2、外周血細胞因子譜的動態(tài)變化。結果顯示:肺結核病人血漿中CXCL12、CCL1及TNF-α等一組細胞因子相對于健康對照和潛伏感染者都有顯著的升高;隨訪隊列中發(fā)病的患者外周血中CXCL12和抗原特異性IFN-γ表達水平隨疾病的發(fā)生而顯著升高。
　　隨之，我們進一步了解細胞因子顯著性差異表達是否與基因組DNA甲基化水平有密切關系。利用全基因組DNA甲基化芯片的方法，我們比較了健康對照和活動性肺結核病人基因組甲基化狀態(tài)。芯片結果顯示:活動

3、性肺結核病人較健康對照呈現顯著性低甲基化狀態(tài)，在1，370個差異性基因中有90.4％的基因（1，234個）甲基化程度降低。GO分析顯示甲基化程度存在差異的基因參與了炎癥反應、B細胞分化等多種免疫相關功能。此結果表明宿主基因的低甲基化狀態(tài)可能是活動性肺結核病人的特征之一。前期實驗表明CXCL12的表達水平與肺結核病密切相關。因此，我們同時利用硫化測序法檢測了健康對照和病人cxcl12基因啟動子區(qū)域的甲基化率。結果表明:活動性肺結核病人cx

4、cl12基因轉錄起始點上游-194bp位點甲基化率較正常人有顯著性下降，并且與患者外周血CXCL12蛋白表達水平呈明顯負相關。
　　綜上所述，肺結核病患者外周血中一組細胞因子的表達存在顯著性增加，其與潛伏感染者和正常人均存在顯著性差異。利用全基因組DNA甲基化芯片分析發(fā)現，宿主基因低甲基化狀態(tài)是結核病患者的顯著特征，其可能與患者異常的免疫反應和細胞因子表達水平升高有關。本論文為深入了解結核病的免疫保護和免疫病理機制提供了新的理論數