糖調(diào)節(jié)受損大鼠認(rèn)知功能障礙及其NF-κB、TNF-α表達(dá).pdf

1、目的:通過(guò)高脂高糖飼養(yǎng)法建立糖調(diào)節(jié)受損大鼠模型，研究大鼠腦組織NF-κB，TNF-α因子在認(rèn)知功能障礙中作用，從炎癥角度探討糖調(diào)節(jié)受損對(duì)認(rèn)知功能障礙的影響。
　　方法:將56只SPF級(jí)wistar雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，每組28只，對(duì)照組給予普通飼料，實(shí)驗(yàn)組給予高脂高糖飼料，監(jiān)測(cè)大鼠體重變化，根據(jù)實(shí)驗(yàn)組食量調(diào)整對(duì)照組食量，飼養(yǎng)20周。8W開(kāi)始，以后每?jī)芍苓M(jìn)行1次葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)，選取空腹、0h、0.5 h、1h、2h、3h五

2、個(gè)時(shí)點(diǎn)測(cè)鼠尾血糖，空腹血糖6.2～7.5mmol/l或者餐后兩小時(shí)血糖7.9～10.4mmol/l的大鼠提示造模成功。將對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組分別于5W、10W、15W、20W進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)，包括適應(yīng)性訓(xùn)練、定位航行訓(xùn)練、空間探索試驗(yàn)三部分。水迷宮試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS20.0軟件，根據(jù)重復(fù)測(cè)量的多因方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果以(X)±s表示，取P=0.05，組間均數(shù)比較采用q檢驗(yàn)。將對(duì)照組28只大鼠（標(biāo)記為A組）和實(shí)驗(yàn)組28只大鼠（標(biāo)記為B組

3、）分別于5W末、10W末、15W末、20W末四個(gè)時(shí)點(diǎn)斷頸處死，每個(gè)時(shí)點(diǎn)每組處死7只，順序標(biāo)記為:A1，B1，A2，B2，A3，B3，A4，B4。4％多聚甲醛固定腦組織24h后用石蠟包埋、切片，采用免疫組化法和原位雜交法檢測(cè)大鼠腦組織NF-κB、TNF-α表達(dá)情況，每張切片在顯微鏡下200*視野下選5個(gè)互不重疊視野，以平均光密度值反映表達(dá)情況。采用SPSS20.0軟件對(duì)大鼠腦組織NF-κB、TNF-α陽(yáng)性表達(dá)及認(rèn)知障礙進(jìn)行Pearson相

4、關(guān)分析。
　　結(jié)果:大鼠體重隨著年齡增長(zhǎng)而增加，實(shí)驗(yàn)組較同齡對(duì)照組體重增加較為明顯(P＜0.05)。與對(duì)照組相比，12W前實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組血糖無(wú)明顯差異（P＞0.05）;12W以后實(shí)驗(yàn)組大鼠血糖升高(P＜0.05);隨著飼養(yǎng)周期延長(zhǎng)，大鼠成模率逐漸增高，15W實(shí)驗(yàn)組全部成模。水迷宮實(shí)驗(yàn)顯示:5W實(shí)驗(yàn)組學(xué)習(xí)記憶能力較對(duì)照組強(qiáng)(P＜0.05)，10W以后實(shí)驗(yàn)組學(xué)習(xí)記憶能力開(kāi)始下降，20W實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組學(xué)習(xí)記憶能力顯著下降(P＜0.01)

5、。NF-κB、TNF-α陽(yáng)性表達(dá)5W和10W實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異不明顯(P＞0.05)，15W實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組有差異(P＜0.05)，20W實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組有顯著差異(P＜0.01)。10W以后實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)NF-κ、TNF-α蛋白和mRNA表達(dá)水平逐漸增高，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Pearson直線相關(guān)回歸分析發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組大鼠學(xué)習(xí)記憶成績(jī)與NF-κB陽(yáng)性表達(dá)水平呈正相，與TNF-α陽(yáng)性表達(dá)水平呈正相關(guān)，而對(duì)照組兩者無(wú)明顯相關(guān)性

6、。
　　結(jié)論:高脂高糖飼養(yǎng)可以建立穩(wěn)定的糖調(diào)節(jié)受損大鼠模型，此模型可以用于糖調(diào)節(jié)受損疾病狀態(tài)的研究;隨著高脂高糖飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠血糖顯著升高。研究結(jié)果提示高脂高糖、年齡增加等因素均與糖調(diào)節(jié)受損有關(guān)。隨著飼養(yǎng)周期的延長(zhǎng)，糖調(diào)節(jié)受損模型的建立，大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力降低。NF-κB和TNF-α陽(yáng)性表達(dá)水平增高與大鼠學(xué)習(xí)記憶能力減退有相關(guān)性，即大鼠腦組織NF-κB和TNF-α的陽(yáng)性表達(dá)水平增高可能參與了大鼠認(rèn)知功能障礙形成的過(guò)程，大鼠腦