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1、腎移植是終末期腎病患者理想的替代治療手段。隨著移植免疫研究的深入及新型免疫抑制劑的應(yīng)用,腎移植術(shù)后6月內(nèi)急性排斥(acuterejection,AR)發(fā)生率從上世紀(jì)九十年代初的43.5%下降到本世紀(jì)初的13.5%。但AR不僅可引起移植腎早期失功,而且是影響移植腎長(zhǎng)期生存最重要的因素之一。 臨床工作中,常常根據(jù)患者血清肌酐(creatinine,Cr)值升高,結(jié)合臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查等,作為診斷AR的指標(biāo),但往往由于缺
2、乏靈敏度、特異度造成治療工作的延遲。 有研究利用監(jiān)測(cè)血、尿可溶性白介素-2受體和可溶性腫瘤壞死因子受體等小分子物質(zhì)判斷AR,但這些檢查的可靠性差,并且尿液保存時(shí)間、透析與否均影響這些指標(biāo)的檢查結(jié)果,臨床應(yīng)用價(jià)值不大。CD30是跨膜糖蛋白,主要表達(dá)于分泌Th2型細(xì)胞因子的T細(xì)胞,當(dāng)CD30+的細(xì)胞活化后,其胞外成分經(jīng)蛋白酶切后釋放入血,形成一種可溶性CD30(solubleCD30,sCD30)。sCD30作為CD30活化釋放入血
3、的活性成分,與CD30具有很好的相關(guān)性。血清中sCD30水平能夠反應(yīng)活化的CD30+細(xì)胞數(shù)量。研究發(fā)現(xiàn)sCD30是除群體反應(yīng)抗體(panelreactiveantibodies,PRA)外允許對(duì)受者移植風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估的免疫學(xué)參數(shù)。檢測(cè)患者移植前的血清sCD30含量提供了預(yù)測(cè)受者排斥反應(yīng)發(fā)生危險(xiǎn)性的另一方法。對(duì)于沒有PRA證據(jù)的患者,該方法非常有效。本文對(duì)腎移植術(shù)后sCD30在AR的診斷及鑒別診斷中是否有意義以及對(duì)AR的治療是否具有指導(dǎo)價(jià)值
4、等方面開展研究。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)是一種多能的細(xì)胞因子,當(dāng)腎臟發(fā)生損傷時(shí)它具有潛在的促進(jìn)腎臟組織重建的功能,包括細(xì)胞形態(tài)的發(fā)生、促有絲分裂、抗細(xì)胞凋亡及減輕組織纖維化和功能障礙。AR引起腎小管細(xì)胞損傷,引起腎臟和其他器官誘導(dǎo)產(chǎn)生HGF,對(duì)受損的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)。我們研究探討了腎移植術(shù)后HGF的動(dòng)態(tài)變化和急性排斥的關(guān)系。本論文分為以下三章: 第一章:sCD30在腎移植術(shù)后的動(dòng)態(tài)觀察
5、 目的:研究腎移植術(shù)前及術(shù)后早期血清sCD30水平的變化規(guī)律,探討sCD30與腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的關(guān)系。 方法:選取本中心的56例腎移植患者進(jìn)行研究,分為3組。A組移植腎功恢復(fù)順利組25例,移植術(shù)后穩(wěn)定恢復(fù),1月內(nèi)未出現(xiàn)急性排斥反應(yīng)的臨床表現(xiàn)。B組急性排斥原因以外引起的移植腎功延遲恢復(fù)(delayedgraftfunction,DGF)組,因急性腎小管壞死(acutetubularnecrosis,ATN)、CsA中毒
6、、外科因素(動(dòng)脈狹窄等)等其它原因引起DGF者10例。C組急性排斥反應(yīng)組,腎移植術(shù)后1月內(nèi)出現(xiàn)急性排斥反應(yīng)的患者21例,其中激素沖擊治療敏感排斥16例,耐激素排斥5例。標(biāo)本來自于移植術(shù)前及術(shù)后常規(guī)臨床檢測(cè)血樣。56例腎移植受者術(shù)前及術(shù)后3、5、7、10、14、21d的血樣,急性排斥組甲基強(qiáng)的松龍(methylprednisolone,MP)沖擊治療前后也抽血?jiǎng)討B(tài)跟蹤。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzymelinkedimmunosorbent
7、assay,ELISA)測(cè)定上述標(biāo)本中血清sCD30的水平。采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析,比較術(shù)后不同時(shí)間sCD30水平的差異,比較各組間sCD30水平的差異,分析sCD30的變化規(guī)律。 結(jié)論:腎移植術(shù)前高sCD30預(yù)示著高的急性排斥風(fēng)險(xiǎn),sCD30可用于移植前的免疫評(píng)估;血清sCD30水平在腎移植術(shù)后3-5天不下降是即將發(fā)生移植腎AR的可靠預(yù)測(cè)因素;sCD30可能參與AR的發(fā)生和發(fā)展,AR患者與順利恢復(fù)患者、移植腎功能延遲恢復(fù)患
8、者的sCD30水平在術(shù)后第3d,第5d,第7d的差異有可能作為鑒別診斷AR的指標(biāo)。sCD30有助于亞臨床排斥的早期預(yù)警,在門診隨訪中把測(cè)定血清sCD30水平作為指標(biāo),有針對(duì)性對(duì)異常升高的受者進(jìn)一步腎活檢檢查,以較小的代價(jià)識(shí)別亞臨床排斥。耐激素排斥sCD30表達(dá)水平強(qiáng)于激素敏感排斥,且沖擊治療后sCD30仍處于高表達(dá),血清sCD30監(jiān)測(cè)抗排斥治療反應(yīng)時(shí),比血肌酐更敏感,更有預(yù)測(cè)價(jià)值,可避免治療效果較差的激素反復(fù)使用,減少副作用,更對(duì)早期使
9、用OKT3提供依據(jù),早期遏制免疫反應(yīng)和免疫損傷。 第二章:肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子在腎移植術(shù)后的動(dòng)態(tài)觀察 目的:研究腎移植術(shù)前及術(shù)后早期血清HGF水平的變化規(guī)律,探討HGF與腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的關(guān)系。 方法:研究對(duì)象、分組及標(biāo)本采集同第一章,用ELISA法測(cè)定標(biāo)本中血清HGF的水平。采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析,比較術(shù)后不同時(shí)間HGF水平的差異,比較各組間HGF水平的差異,分析HGF的變化規(guī)律。 結(jié)論:血清HGF
10、的檢測(cè)對(duì)于腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的早期診斷可能成為一個(gè)臨床有意義的標(biāo)記物。HGF在各種原因引起的移植腎功受損時(shí)反應(yīng)性升高,HGF在急性排斥和移植腎功能延遲恢復(fù)時(shí)升高的程度有明顯不同,恢復(fù)順利組術(shù)后HGF平穩(wěn)下降,這些對(duì)臨床上這三類患者的鑒別診斷有重要意義。在激素沖擊治療前,耐激素排斥的HGF水平比激素敏感排斥更高,且沖擊治療后耐激素排斥HGF水平降低幅度較小,血清HGF有助于鑒別激素敏感排斥和耐激素排斥。HGF促進(jìn)腎臟代償性生長(zhǎng),參與腎
11、小管損傷功能修復(fù)的作用,有望在臨床上應(yīng)用于移植腎急慢性損傷的治療。 第三章:sCD30與肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子檢測(cè)診斷移植腎急性排斥 目的:分析sCD30與肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子水平診斷及鑒別診斷急性排斥的價(jià)值 方法:在有檢測(cè)水平差異的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上,急性排斥組和移植腎功能延遲恢復(fù)組、恢復(fù)順利組的sCD30與肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子水平進(jìn)行受試者工作特征曲線(Receiveroperatingcharacteristic,ROC)分析,評(píng)價(jià)
12、其診斷價(jià)值,并結(jié)合靈敏度和特異度確定合適的診斷界限值。 結(jié)論:ROC分析顯示sCD30和HGF作為一項(xiàng)腎移植術(shù)后AR的無創(chuàng)檢測(cè)指標(biāo),具有良好的診斷價(jià)值,具有較高的靈敏度和特異度,幫助對(duì)急性排斥反應(yīng)及腎功順利恢復(fù)、ATN、CsA中毒等診斷和鑒別診斷。sCD30和HGF聯(lián)合分析顯示:對(duì)于術(shù)前檢測(cè)sCD30水平高,提示術(shù)后AR發(fā)生危險(xiǎn)較大的患者,若術(shù)后5天的HGF水平高,應(yīng)高度考慮排斥的可能,而對(duì)于兩者檢測(cè)水平皆不高的患者,發(fā)生排斥的
13、可能性較小。sCD30是同種移植免疫應(yīng)答中表現(xiàn)活躍的標(biāo)記物,對(duì)等待移植的患者常規(guī)監(jiān)測(cè)sCD30,根據(jù)其水平變化并結(jié)合HGF評(píng)估排斥反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn),制定相應(yīng)的抗排斥反應(yīng)治療措施,將有利于提高患者移植腎的存活率,有助于根據(jù)受者免疫狀態(tài)選擇個(gè)體化的免疫抑制治療方案。在本研究中因受客觀條件限制,例數(shù)較少。在一定程度上影響到本研究的結(jié)果。sCD30和HGF指標(biāo)剛研究開始不久,尚有許多問題和未知領(lǐng)域等待研究探討,尤其是某些相關(guān)基礎(chǔ)研究需研究突破。相信隨著
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