谷氨酸與SAS對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞CLIC4及凋亡相關(guān)基因的影響.pdf

1、目的:觀察谷氨酸與SAS對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的影響，并探討線粒體氯通道蛋白/CLIC4及凋亡相關(guān)基因的變化。
　　方法：應(yīng)用四氮唑(MTT)比色法檢測神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的活性；紫外分光光度法檢測細(xì)胞內(nèi)還原型谷胱甘肽含量及培養(yǎng)液上清LDH釋放率；用RT-PCR法測定C6細(xì)胞Bcl-2、Bax、CLIC4、EAAT-3、mGlu4、mGlu6的mRNA的表達(dá)；用Western blotting法測定C6細(xì)胞Bcl-2、Bax、CLIC4、p3

2、8、EAAT-3的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.SAS及谷氨酸可分別引起C6細(xì)胞生存率降低，SAS和谷氨酸聯(lián)合添加細(xì)胞與單獨(dú)添加組比較，細(xì)胞生存率降低更明顯；
　　2.SAS添加細(xì)胞LDH釋放率明顯增高，而谷氨酸組沒有變化；
　　3.谷氨酸和SAS分別添加細(xì)胞GSH含量均降低，合加組降低更加明顯；
　　4.加藥后SAS1.5mmol/L添加C6細(xì)胞Bcl-2mRNA水平低于對照組，Bax無明顯趨勢，谷氨酸

3、30mmol/L和合加組添加C6細(xì)胞的CLIC4mRNA水平低于對照組，SAS添加C6細(xì)胞的EAAT-3mRNA表達(dá)降低，谷氨酸30mmol/L添加C6細(xì)胞的mGlu4和mGlu6的mRNA表達(dá)均降低；
　　5.SAS添加C6細(xì)胞CLIC4、Bax和p38的蛋白表達(dá)高于對照組，而Bcl-2低于對照組，其它組無變化，SAS添加C6細(xì)胞組EAAT-3蛋白表達(dá)降低。
　　結(jié)論:
　　1.谷氨酸和SAS均可引起C6細(xì)胞損傷，谷

4、氨酸與SAS合加細(xì)胞損傷更為明顯；
　　2.氧化應(yīng)激造成的GSH耗竭可能是谷氨酸和SAS引起C6細(xì)胞損傷的主要機(jī)制之一；
　　3.LDH升高，Bcl-2表達(dá)降低，Bax表達(dá)增高，提示SAS可能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡為主，而谷氨酸引起細(xì)胞損傷過程中，以上指標(biāo)無明顯變化，提示谷氨酸可能誘導(dǎo)細(xì)胞壞死為主；
　　4.SAS上調(diào)了CLIC4表達(dá)，CLIC4可能與凋亡有關(guān)，p38表達(dá)增高，提示p38MAPK信號通路可能參與了 SAS導(dǎo)致細(xì)胞