LY-96在小鼠心肌肥厚及纖維化中的作用研究.pdf

1、目的:通過主動脈縮窄術誘導建立小鼠心肌肥厚模型,同時,構建LY-96基因敲除小鼠和心臟特異性LY-96轉(zhuǎn)基因小鼠,以探討LY-96在心肌肥厚及纖維化中的作用。
　　方法:選取8-10周齡、體重23.5-27.5g的雄性C57BL/6野生型小鼠(WT)、LY-96基因敲除小鼠(LY-96KO,C57BL/6背景)、非轉(zhuǎn)基因小鼠(NTG,C57BL/6背景)及心臟特異性LY-96轉(zhuǎn)基因小鼠(LY-96TG,C57BL/6背景)為研究對

2、象,通過對實驗小鼠進行主動脈縮窄術(AorticBinding,AB)建立心肌肥厚模型,分為假手術組(SHAM組)、模型組(AB組)。LY-96KO組及其對照組在術后4周檢測相關指標,而LY-96TG組及其對照組在術后8周檢測相關指標。首先運用超聲心動圖和血流動力學檢測評價心功能;取材觀察心臟大體形態(tài)并計算心臟重量與體重的比值(HW/BW)、肺臟重量與體重的比值(LW/BW)及心臟重量與脛骨長度比值(HW/TL);心肌組織行HE染色觀察

3、心肌細胞橫截面積,PSR染色觀察膠原改變;實時熒光定量PCR檢測各組小鼠心肌組織中心肌肥厚標志物(ANP、BNP、α-MHC、β-MHC、SERCA-2α)的mRNA表達水平。
　　結(jié)果:主動脈縮窄術誘導的心肌肥厚模型組中,LY-96TG小鼠反映心功能的指標射血分數(shù)、短軸縮短率、dp/dtmax降低的程度均小于NTG小鼠;心肌肥厚的指標左室舒張末內(nèi)徑、左室收縮末內(nèi)徑、室間隔厚度均明顯低于NTG小鼠。而LY-96KO小鼠表現(xiàn)出相反的

4、結(jié)果。取材發(fā)現(xiàn)LY-96TG小鼠的HW/BW和HW/TL明顯低于NTG小鼠,LY-96KO小鼠的以上指標均比WT小鼠高。HE和PSR染色顯示LY-96TG小鼠心肌細胞橫截面積及纖維化程度明顯小于NTG小鼠,而LY-96KO小鼠增加。實時熒光定量PCR顯示與WT小鼠比較,LY-96KO小鼠心肌組織中ANP、BNP、β-MHC及纖維化標志物(CollagenIα、CollagenIII、TGF-β1、TGF-β2、CTGF)的mRNA表達水