LY-96在小鼠心肌肥厚及纖維化中的作用研究.pdf

1、目的:通過(guò)主動(dòng)脈縮窄術(shù)誘導(dǎo)建立小鼠心肌肥厚模型,同時(shí),構(gòu)建LY-96基因敲除小鼠和心臟特異性LY-96轉(zhuǎn)基因小鼠,以探討LY-96在心肌肥厚及纖維化中的作用。
　　方法:選取8-10周齡、體重23.5-27.5g的雄性C57BL/6野生型小鼠(WT)、LY-96基因敲除小鼠(LY-96KO,C57BL/6背景)、非轉(zhuǎn)基因小鼠(NTG,C57BL/6背景)及心臟特異性LY-96轉(zhuǎn)基因小鼠(LY-96TG,C57BL/6背景)為研究對(duì)

2、象,通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行主動(dòng)脈縮窄術(shù)(AorticBinding,AB)建立心肌肥厚模型,分為假手術(shù)組(SHAM組)、模型組(AB組)。LY-96KO組及其對(duì)照組在術(shù)后4周檢測(cè)相關(guān)指標(biāo),而LY-96TG組及其對(duì)照組在術(shù)后8周檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。首先運(yùn)用超聲心動(dòng)圖和血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)評(píng)價(jià)心功能;取材觀察心臟大體形態(tài)并計(jì)算心臟重量與體重的比值(HW/BW)、肺臟重量與體重的比值(LW/BW)及心臟重量與脛骨長(zhǎng)度比值(HW/TL);心肌組織行HE染色觀察

3、心肌細(xì)胞橫截面積,PSR染色觀察膠原改變;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組小鼠心肌組織中心肌肥厚標(biāo)志物(ANP、BNP、α-MHC、β-MHC、SERCA-2α)的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:主動(dòng)脈縮窄術(shù)誘導(dǎo)的心肌肥厚模型組中,LY-96TG小鼠反映心功能的指標(biāo)射血分?jǐn)?shù)、短軸縮短率、dp/dtmax降低的程度均小于NTG小鼠;心肌肥厚的指標(biāo)左室舒張末內(nèi)徑、左室收縮末內(nèi)徑、室間隔厚度均明顯低于NTG小鼠。而LY-96KO小鼠表現(xiàn)出相反的

4、結(jié)果。取材發(fā)現(xiàn)LY-96TG小鼠的HW/BW和HW/TL明顯低于NTG小鼠,LY-96KO小鼠的以上指標(biāo)均比WT小鼠高。HE和PSR染色顯示LY-96TG小鼠心肌細(xì)胞橫截面積及纖維化程度明顯小于NTG小鼠,而LY-96KO小鼠增加。實(shí)時(shí)熒光定量PCR顯示與WT小鼠比較,LY-96KO小鼠心肌組織中ANP、BNP、β-MHC及纖維化標(biāo)志物(CollagenIα、CollagenIII、TGF-β1、TGF-β2、CTGF)的mRNA表達(dá)水