沙門氏菌Ⅰ類整合子中耐藥基因水平轉(zhuǎn)移研究.pdf

1、為了解貴州省規(guī)模養(yǎng)殖場豬源沙門氏菌I類整合子的流行情況、整合子中耐藥基因盒的種類以及I類整合子攜帶耐藥基因與細菌耐藥表型的相關(guān)性，建立體外和小鼠腸道中I類整合子攜帶耐藥基因盒水平傳播模型，探討異源異種細菌間耐藥性水平轉(zhuǎn)移的可能性，評估動物細菌耐藥性向人源細菌傳播的風(fēng)險頻率。
　　本研究從貴州省六盤水市和畢節(jié)地區(qū)7個縣（市）的39個的規(guī)?；B(yǎng)殖場中豬肛門拭子及豬場總排污池棉拭子398份樣品，按照國家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T4789.4—201

2、0）分離得到沙門氏菌57株，采用微量肉湯稀釋法，參照參照CLSI（2009版）標(biāo)準(zhǔn)，測定57株沙門氏菌對12種抗菌藥物敏感性。結(jié)果表明：57株沙門氏菌對土霉素、氨芐西林、阿莫西林、大觀霉素、氧氟沙星、恩諾沙星、慶大霉素、磺胺異惡唑、氟苯尼考、頭孢噻呋、復(fù)方新諾明和多粘菌素E的耐藥率分別為100％、89.5%、89.5%、89.5%、84.2%、68.4%、57.9%、57.9%、52.6%、47.4%、26.3%、22.8%；分離鑒定沙

3、門氏菌多重耐藥率達100%，最少對2種藥物耐藥，最多對12種受試藥物全部耐藥。該地區(qū)的規(guī)模養(yǎng)豬場耐藥形式嚴(yán)峻。
　　應(yīng)用PCR方法檢測57株沙門氏菌中I類整合子的攜帶率以及I類整合子中可變區(qū)攜帶的耐藥基因盒類型，采用Х2檢驗分析I類整合子攜帶與細菌耐藥表型的相關(guān)性。結(jié)果表明：57株沙門氏菌中檢測出23株攜帶有I類整合子，檢出率為40.4%(23/57)，其中18株含有耐藥基因盒，攜帶率為31.6%(18/57)；18株沙門氏菌I類

4、整合子基因盒陽性株共含有7種不同的耐藥基因，即氨基糖苷類：aadA2、aadA5、aadA22、aadA23b、磺胺類：dfrA1、dfrA12、dfrA17；經(jīng)X2檢驗得出整合子陽性菌株對抗菌藥物的耐藥率極顯著或顯著高于整合子陰性菌株，說明耐藥基因與I類整合子、耐藥表型與細菌多重耐藥之間存在著一定的聯(lián)系。
　　在無抗菌藥物壓力條件下，對攜帶I類整合子耐藥基因盒的豬源沙門氏菌與人源大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌進行體內(nèi)、外接合試驗，

5、研究動物源細菌耐藥性向人源細菌轉(zhuǎn)移風(fēng)險頻率。結(jié)果表明：豬源沙門氏菌與人源大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌的體外接合頻率在10-3~10-5之間，與人源金黃色葡萄球菌的體外接合頻率在10-7~10-8之間，豬源沙門氏菌整合子攜帶耐藥基因盒向人源革蘭氏陰性菌體外轉(zhuǎn)移頻率在1.6×10-3~8.3×10-6cfu/mL(供體菌)，在人源革蘭氏陽性菌中并未檢測到豬源整合子及耐藥基因盒；豬源沙門氏菌整合子攜帶耐藥基因盒與人源大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏