豬源致病性沙門氏菌氨基糖苷類耐藥基因PCR檢測(cè)研究.pdf

1、本研究采用瓊脂平板稀釋法測(cè)定了不同規(guī)?；i場(chǎng)分離的25株豬源致病性沙門氏菌對(duì)4種氨基糖苷類藥物(鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素及新霉素)的最低抑菌濃度(MIC)，參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)(2005)，判定菌株的耐藥性。結(jié)果表明，25株菌對(duì)四種氨基糖苷類藥物產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，其中對(duì)鏈霉素耐藥率為64％、對(duì)卡那霉素耐藥率為60％、對(duì)慶大霉素的耐藥率為24％、對(duì)新霉素的耐藥率為12％。 根據(jù)GenBank中注冊(cè)的

2、氨基糖苷類耐藥基因序列，設(shè)計(jì)了9對(duì)引物，并分別對(duì)9種耐藥基因進(jìn)行了擴(kuò)增。結(jié)果擴(kuò)增到了aph(3')-Ⅱa、aadA1、aadA2、aadB四種耐藥基因。在25株菌中，有16株菌含有aph(3')-Ⅱa基因，檢出率為64％；9株菌含有aadA1基因，檢出率為36％；5株菌含有aadA2基因，檢出率為20％；7株菌含有aadB基因，檢出率為28％。藥敏試驗(yàn)結(jié)果與耐藥基因的檢測(cè)結(jié)果符合率為90％，具有很高的一致性。 將從CDPS2-1

3、擴(kuò)增到的aph(3’)-Ⅱ a，aadA1，aadA2，aadB進(jìn)行了核酸序列測(cè)定，并與GenBank中注冊(cè)的相應(yīng)耐藥基因進(jìn)行了比較分析，結(jié)果表明：擴(kuò)增到的aph(3’)-Ⅱ a基因與GenBank中注冊(cè)的5個(gè)來源于沙門氏菌的aph(3’)-Ⅱa基因序列的同源性在98.8％以上；擴(kuò)增到的aadAl與GenBank中注冊(cè)的5個(gè)來源于沙門氏菌的aadAl基因序列的同源性在98.4％以上；擴(kuò)增到的aadA2與GenBank中注冊(cè)的5個(gè)來源于沙