優(yōu)勢(shì)酒曲根霉產(chǎn)酶條件及耐硒能力的研究.pdf

1、酒曲根霉(Rhizopus)是藻狀菌門(Phycomycetes)毛霉科(Mucoraceae)的菌類，在生長(zhǎng)的過程中可產(chǎn)生大量的淀粉酶、液化酶、蛋白酶等，酒曲根霉生長(zhǎng)的好壞直接影響酶產(chǎn)量和酶活性即影響曲的質(zhì)量，進(jìn)而影響出酒率。湖北恩施自治州是以玉米為原料生產(chǎn)小曲白酒的地區(qū)，我們的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，恩施白酒出酒率不高的原因在于曲的質(zhì)量比較差。為提高曲的質(zhì)量，我們進(jìn)行了酒曲分離純化和優(yōu)勢(shì)菌株篩選工作，并對(duì)所獲優(yōu)勢(shì)菌株的生長(zhǎng)條件、產(chǎn)酶條件、酶反應(yīng)條

2、件、耐硒能力進(jìn)行了研究。用福林～酚試劑法測(cè)定蛋白酶活力；3，5-二硝基水楊酸比色定糖法測(cè)定糖化酶活力、液化酶(a-淀粉酶)活力；將篩選的優(yōu)勢(shì)菌株在不同的硒濃度下進(jìn)行液體培養(yǎng)，測(cè)定酶活性，并對(duì)根霉進(jìn)行洗脫、收集、干燥后，用石墨爐原子吸收分光光度法測(cè)定硒的含量。主要研究結(jié)果如下： 1、從恩施州5家酒曲廠采得5個(gè)酒曲樣品，經(jīng)分離純化，獲得14個(gè)酒曲根霉菌株，通過對(duì)其生長(zhǎng)量、糖化酶和液化酶活性的比較，篩選出了三個(gè)優(yōu)勢(shì)較明顯的菌株，即ER

3、hl123、ERh3421、ERh5131。 2、培養(yǎng)基pH值、培養(yǎng)時(shí)間、硒濃度對(duì)ERhl123、ERh3421、ERh5131的生長(zhǎng)和所產(chǎn)酶的活性有明顯的影響。在pH 4.8-pH 5.2培養(yǎng)3d-4d，培養(yǎng)基中添加5％-10％的玉米粉能顯著提高ERhl123、ERh3421、ERh5131根霉菌株產(chǎn)量和酶活性。 3、在3個(gè)菌株中，ERh3421的優(yōu)勢(shì)更明顯，其糖化酶的活性達(dá)7.46×10<'2>u/g，液化酶達(dá)4.2

4、7×10<'3>u/g，蛋白酶達(dá)3.06×10<'2>u/g。在淀粉糖化時(shí)調(diào)至pH 5.8有利于提高3種酶的活性。通過對(duì)ERh3421菌株正交組合實(shí)驗(yàn)，液化酶活性、糖化酶活性分別為9.43×103 u/g和6.83×103 u/g，且與其他組合下的酶活性有顯著差異，最佳組合為：pH5.2，溫度30℃，玉米粉濃度5％。 4、在生產(chǎn)過程中，應(yīng)根據(jù)需要控制溫度，提高糖化酶、液化酶的活性時(shí)將溫度控制在30℃，提高蛋白酶的活性時(shí)將溫度控制