長沙漢族人群VLDL-LDL代謝途徑相關(guān)基因多態(tài)性與腦出血的關(guān)系研究.pdf

1、背景與目的： 腦血管病是當今世界公認的三大主要疾病死因之一，腦出血（Cerebral hemorrhage，CH）占其中10～55％，其病死率、致殘率高，嚴重危害人類健康。腦出血的病理機制復(fù)雜。目前認為，腦出血主要是由于多個易感基因的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotides polymorphisms，SNPs）微效作用的累加，并與環(huán)境因素共同作用而發(fā)病。對腦出血候選基因SNPs的研究將有助于闡明腦出血的遺傳本質(zhì)，為

2、腦出血易感患者的早期檢出和預(yù)防提供堅實的理論依據(jù)和實踐指導(dǎo)。 動脈粥樣硬化是腦出血的危險因素。而極低密度脂蛋白（Very low density lipoprotein，VLDL）及低密度脂蛋白（Low density lipoprotein，LDL）是目前公認的重要致動脈粥樣硬化因子，內(nèi)源性VLDL/LDL代謝途徑失調(diào)節(jié)，可能導(dǎo)致VLDL/LDL水平升高及動脈粥樣硬化，增加腦出血的風(fēng)險。迄今，有關(guān)VLDL/LDL代謝途徑相關(guān)基

3、因與腦出血的關(guān)系國內(nèi)外少見報道。本研究旨在探討該途徑載脂蛋白AⅠ-CⅢ-AⅣ（Apolipoprotein AⅠ-CⅢ-AⅣ，ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ），載脂蛋白B（Apolipoprotein B，ApoB）、脂蛋白脂酶（Lipoprotein lipase，LPL）、低密度脂蛋白受體（Low density lipoprotein receptor，LDLR）、人類枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶9（Proprotein convertase sub

4、tilisin/kexin type9，PCSK9）基因與長沙地區(qū)漢族人群腦出血的關(guān)系。 方法： 研究對象均來自長沙地區(qū)漢族人群，包括：1.有家族聚集現(xiàn)象的腦出血家系組（cerebral hemorrhage with family history，CHFH）：共38個家系，包括家系成員200例，分為以下亞組：①家系組腦出血患者組：61例，男34例女27例，平均年齡53.26±10.60歲。②Ⅰ級親屬組：95例，男50例

5、，女45例，平均年齡51.15±14.45歲。⑨Ⅱ級親屬組：23例，男9例女14例，平均年齡36.82±18.68歲。④健康無血緣關(guān)系親屬：共21例，男12例女9例，平均年齡52.32±12.74歲，來自家系中與先證者無血緣關(guān)系的家庭成員，為先證者及其Ⅰ、Ⅱ級親屬的配偶。2.散發(fā)性腦出血（Sporadic cerebral hemorrhage，SCH）組：273例，男138例，女135例，平均年齡55.38±12.08歲。3.正常對照

6、（control）組：140例，其中男74例，女66例，平均年齡53.62±13.28歲。 血脂的檢測：采用氧化酶法測定甘油三脂（Triglyceride，TG）、總膽固醇（Total cholesterol，TC）；測定高密度脂蛋白（High density lipoprotein，HDL）先用沉淀劑沉淀，再用氧化酶法測定上清液中的膽固醇；低密度脂蛋白（Low density lipoprotein，LDL）由Friedwal

7、d公式：LDL=（CHO-HDL）-TG/5計算。 基因分型：利用多重單堿基延伸技術(shù)與DNA測序結(jié)合相互印證的方法檢測所有研究對象VLDL/LDL代謝途徑5個基因12個SNPs位點多態(tài)性，包括：Apo AⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs12721026、rs2854116、rs45487004、rs670，ApoB基因rs1367117、rs11279109，LPL基因rs320，LDLR基因rs2569542、rs688、rs5925，

8、PCSK9基因rs11206510、rs5051510 統(tǒng)計：采用SPSS軟件對散發(fā)性腦出血與正常對照組進行統(tǒng)計分析，兩組間基因型與等位基因頻率的差異用X2檢驗，不同基因型亞組間血脂比較采用ANOVA方差分析。采用FBAT軟件對有家族聚集現(xiàn)象腦出血家系的多態(tài)性位點及其構(gòu)建的單體型進行傳遞不平衡檢驗（Transmission disequilibrium test，TDT）。 結(jié)果： 1.①長沙地區(qū)漢族人群存在Ap

9、oAⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs12721026、rs2854116、rs45487004、rs670位點多態(tài)性。②散發(fā)性腦出血組ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs12721026、rs2854116、rs45487004、rs670多態(tài)各基因型及等位基因頻率分布與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。③TDT分析未發(fā)現(xiàn)ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs2854116、rs45487004、rs670多態(tài)性位點的等位基因存在傳遞不平衡現(xiàn)象（P>

10、0.05）。④對rs12721026、rs2854116、rs45487004、rs670構(gòu)成的單體型的TDT分析未發(fā)現(xiàn)單個特異單體型存在過度傳遞現(xiàn)象（P>0.05）。⑤散發(fā)性腦出血組及對照組rs12721026多態(tài)TT基因型亞組的HDL水平顯著高于GT/GG基因型亞組（P<0.05），rs670多態(tài)AA基因型亞組的HDL水平顯著高于GG、GA基因型亞組（P<0.05）。 2.①長沙地區(qū)漢族人群apoB基因存在rs1367117

11、、rs11279109位點多態(tài)性。②散發(fā)性腦出血組apoB基因rs1367117、rs11279109多態(tài)各基因型及等位基因頻率分布與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。③TDT分析未發(fā)現(xiàn)apoB基因rs1367117、rs11279109多態(tài)性位點的等位基因存在傳遞不平衡現(xiàn)象（P>0.05）。④對rs1367117、rs11279109構(gòu)成的單體型的TDT分析未發(fā)現(xiàn)單個特異單體型存在過度傳遞現(xiàn)象（P>0.05）。⑤散發(fā)性腦出血

12、組及對照組rs11279109多態(tài)DD/DI基因型亞組的TC水平顯著高于Ⅱ基因型亞組（P<0.05），對照組rs1367117多態(tài)GA/AA基因型亞組的TC水平顯著高于GG基因型亞組（P<0.05）。 3.①長沙地區(qū)漢族人群存在LPL基因rs320位點多態(tài)性。②散發(fā)性腦出血組與對照組的LPL基因rs320位點基因型分布有統(tǒng)計學(xué)差異（X2=6.95，p=0.031），散發(fā)性腦出血組T等位基因頻率顯著高于對照組（X2=5.05，p=

13、0.025）。③TDT結(jié)果顯示LPL基因rs320 T等位基因傳遞顯著增多（2=2.144，P=0.034）。④散發(fā)性腦出血組rs320位點TT/GT基因型亞組的TG水平顯著高于GG基因型亞組（P<0.05）。 4.①長沙地區(qū)漢族人群LDLR基因存在rs2569542、rs688、rs5925位點多態(tài)性。②LDLR基因rs2569542、rs688、rs5925多態(tài)各基因型及等位基因頻率分布與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.

14、05）。③TDT分析未發(fā)現(xiàn)LDLR基因rs2569542、rs688、rs5925多態(tài)性位點的等位基因存在傳遞不平衡現(xiàn)象（P>0.05）。④對rs2569542、rs688、rs5925構(gòu)成的單體型的TDT分析未發(fā)現(xiàn)單個特異單體型存在過度傳遞現(xiàn)象（P>0.05）。⑤散發(fā)性腦出血組及對照組LDLR基因rs2569542、rs688、rs5925位點不同基因型TG、TC、HDL及LDL水平無顯著差異（P>0.05）。 5.①長沙地區(qū)

15、漢族人群存在PCSK9基因rs11206510、rs505151位點多態(tài)性。②散發(fā)性腦出血組PCSK9基因rs11206510位點CC/CT基因型及C等位基因頻率顯著高于對照組（X2=4.19，p=0.041；X2=4.28，p=0.039）。散發(fā)性腦出血組rs505151位點基因型及等位基因頻率分布與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。③散發(fā)性腦出血組及對照組rs505151多態(tài)GA/GG基因型亞組的LDL水平顯著高于AA基因

16、型亞組（P<0.05）。 結(jié)論： 1.LPL基因rs320多態(tài)T等位基因、PCSK9基因rs11206510多態(tài)C等位基因可能與長沙漢族人群腦出血發(fā)病有關(guān)。 2.ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs12721026、rs2854116、rs45487004、rs670，ApoB基因rs1367117、rs11279109，LDLR基因rs2569542、rs688、rs5925，PCSK9基因rs505151多態(tài)性可能

17、與長沙漢族人群腦出血無關(guān)。 3.ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs12721026、rs2854116、rs45487004、rs670，ApoB基因rs1367117、rs11279109，LDLR基因rs2569542、rs688、rs5925位點構(gòu)建的單體型可能與長沙漢族人群腦出血無關(guān)。 4.ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因rs670、rs12721026，ApoB基因rs11279109、rs1367117，LPL基因rs