Vα24 NKT細(xì)胞的體外擴(kuò)增和生物學(xué)功能研究.pdf

1、　　本研究擬建立體外誘導(dǎo)擴(kuò)增Vα24NKT細(xì)胞的方法，探討特異抗原和細(xì)胞因子對(duì)擴(kuò)增的影響；其次評(píng)價(jià)擴(kuò)增的Vα24NKT細(xì)胞的特性以及細(xì)胞因子對(duì)其特性的影響；確定Vα24NKT細(xì)胞體外腫瘤殺傷活性以及對(duì)同種反應(yīng)性T細(xì)胞免疫應(yīng)答的抑制；初步論證Vα24NKT細(xì)胞在人-小鼠異種移植中的作用。　　本研究顯示α-GalCer能刺激成人外周血或臍帶血單個(gè)核細(xì)胞中的Vα24NKT細(xì)胞短期內(nèi)大量擴(kuò)增。外周血擴(kuò)增效果優(yōu)于臍帶血。臍帶血CD34細(xì)胞能在不

2、含NKT細(xì)胞特異配體的細(xì)胞因子培養(yǎng)體系中誘導(dǎo)擴(kuò)增Vα24NKT細(xì)胞，但效率相對(duì)較低。IL-2和IL-15是α-GalCer刺激擴(kuò)增Vα24NKT細(xì)胞的基礎(chǔ)細(xì)胞因子。在α-GalCer存在時(shí)，IL-2和IL-15趨向于促進(jìn)CD4-NKT細(xì)胞優(yōu)先擴(kuò)增。在此基礎(chǔ)上，IL-12、IFN-γ促進(jìn)CD4-NKT優(yōu)先擴(kuò)增，IL-7則促進(jìn)CD4+NKT細(xì)胞擴(kuò)增。經(jīng)α-Galcer擴(kuò)增的Vα24NKT細(xì)胞能在有絲分裂原刺激下出現(xiàn)體外增殖反應(yīng)；并能大量生成

3、IL-4和IFN-γ，以IFN-γ為主。IL-7主要通過作用于CD4+NKT細(xì)胞而促進(jìn)IL-4的生成；IL-12和IFN-γ可能促使IFN-γ的生成。這種可能效應(yīng)是通過無(wú)差異地作用于CD4+和CD4-細(xì)胞亞群來實(shí)現(xiàn)。Vα24NKT細(xì)胞能有效殺傷腫瘤細(xì)胞系HL-60、KGla和Raji，對(duì)NK細(xì)胞敏感細(xì)胞系K562無(wú)效；同時(shí)Vα24NKT細(xì)胞能有效抑制同種反應(yīng)性T細(xì)胞免疫應(yīng)答。在人-小鼠GVHD模型中，體外擴(kuò)增的Vα24NKT細(xì)胞可能有助