先天性心臟病GATA4基因的突變檢測(cè)以及一個(gè)視網(wǎng)膜色素變性家系中新RPGR突變的發(fā)現(xiàn).pdf

1、本論文包含兩個(gè)部分，一是在散發(fā)的先天性心臟病病人中，進(jìn)行GATA4基因的突變檢測(cè)；二是應(yīng)用連鎖分析和突變檢測(cè)，研究一個(gè)顯性遺傳的視網(wǎng)膜色素變性家系的致病基因。 先天性心臟病大多表現(xiàn)為綜合征，癥狀較為復(fù)雜，其發(fā)病原因也非常復(fù)雜。隨著分子生物學(xué)研究技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的與先天性心臟病有關(guān)的基因被發(fā)現(xiàn)與克隆。GATA4是GATA轉(zhuǎn)錄因子家族的一員，對(duì)于心臟原基細(xì)胞的形成以及隨后細(xì)胞的分化、轉(zhuǎn)移，以及心臟的發(fā)育起著重要的調(diào)控作用。運(yùn)用單

2、鏈構(gòu)象多態(tài)性分析以及DNA測(cè)序相結(jié)合的突變檢測(cè)方法，對(duì)所收集到的31個(gè)散發(fā)先天性心臟病病人進(jìn)行了GATA4全部編碼區(qū)的突變篩查，在兩個(gè)患者中發(fā)現(xiàn)2個(gè)錯(cuò)義突變，分別為位于第4外顯子的第267密碼子纈氨酸突變?yōu)榈鞍彼?p.Val267Met)，和第6外顯子的第380密碼子纈氨酸突變?yōu)榈鞍彼?p.Val380Met)。對(duì)200個(gè)無(wú)親緣關(guān)系正常對(duì)照的單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)核苷酸改變，推測(cè)這兩個(gè)外顯子中的突變是病人先天性心臟病的遺傳

3、基礎(chǔ)，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢證實(shí)它們是兩個(gè)尚未發(fā)現(xiàn)的新突變。 應(yīng)用連鎖分析，以及直接測(cè)序方法，對(duì)浙江一個(gè)視網(wǎng)膜色素變性家系進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究。通過(guò)連鎖分析，發(fā)現(xiàn)該家系的致病基因與X染色體上Xp11.4處的微衛(wèi)星多態(tài)標(biāo)記DXS1068等連鎖，進(jìn)一步對(duì)該區(qū)域內(nèi)RPGR基因的19個(gè)外顯子，以及ORF15進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)患者的RPGR基因的ORF15發(fā)生1166delA缺失，這一缺失引起推測(cè)的RPGR蛋白發(fā)生移碼突變，產(chǎn)生截短65個(gè)氨基酸，并含有