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文檔簡介
1、目的:研究HMGA1對甲狀腺癌SW579細胞Snail表達的影響,并對其作用機制進行初步探討,為揭示HMGA1相關(guān)的Snail的發(fā)生機制提供一種新的思路。
方法:用免疫組化的方法檢測HMGA1抗體在組織組合芯片上的表達,并對HMGA1與甲狀腺癌組織的臨床參數(shù)相關(guān)性進行分析。采用RT-PCR、Western-blot技術(shù)檢測SW579細胞中HMGA1沉默后Snail在mRNA與蛋白水平的表達;將構(gòu)建成功的Snail基因的啟動子蟲
2、熒光素酶報告質(zhì)粒與HMGA1表達質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染SW579細胞,利用雙熒光素酶報告系統(tǒng),檢測HMGA1對Snail啟動子活性的影響。
結(jié)果:
1.組織芯片結(jié)果顯示:HMGA1在甲狀腺癌組織中表達明顯高于正常甲狀腺組織,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在甲狀腺癌組織中,HMGA1在女性甲狀腺癌患者的陽性表達率顯著高于男性甲狀腺癌患者,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);HMGA1的表達與病理分型有相關(guān)性,在甲狀腺乳頭狀癌中的表達顯著
3、高于濾泡狀癌和未分化癌,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。HMGA1的表達與患者的年齡和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P﹥0.05);
2.甲狀腺癌SW579細胞瞬時轉(zhuǎn)染HMGA1 siRNA序列48h后,RT-PCR、Western blot結(jié)果顯示HMGA1 siRNA組與細胞對照組比較,HMGA1、Snail在mRNA及蛋白水平的表達均降低;
3.成功構(gòu)建了Snail啟動子的熒光素酶報告質(zhì)粒,證明了該啟動子有明顯活性。將Sn
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