白藜蘆醇單獨(dú)及聯(lián)合順鉑對(duì)FRH-0201細(xì)胞的影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探訂白藜蘆醇(RES)與順鉑(DDP)聯(lián)合應(yīng)用對(duì)肝門部膽管癌細(xì)胞系FRH-0201的影響。
　　 方法：人肝門部膽管癌細(xì)胞株FRH-0201細(xì)胞復(fù)蘇后常規(guī)培養(yǎng)于含有10％小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中，用0.25％的胰酶消化傳代。以FRH-0201細(xì)胞為研究對(duì)象，設(shè)RES單獨(dú)作用組和DDP單獨(dú)作用組(藥物作用梯度為5、10、20、40、80、160、320umo1/L):聯(lián)合用藥1組(20umol/L RES+上述不同

2、濃度DDP)、聯(lián)合用藥2組（40umol/L RES+上述不同濃度DDP）；空白對(duì)照組（與以上各組同步操作，但不接種細(xì)胞）；陰性對(duì)照組（與以上各組同步操作，但用相同體積的培養(yǎng)基代替藥物）。應(yīng)用MTT比色法和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測RES、DDP對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制作用，利用中效原理計(jì)算出RES、DDP對(duì)癌細(xì)胞抑制的中效劑量（IC50）；光學(xué)顯微鏡觀察RES、DDP處理后癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測RES、DDP作用后的細(xì)胞周期改變及細(xì)胞凋亡率

3、；采用SPSS1O.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果t檢驗(yàn)及方差分析，流式細(xì)胞術(shù)采用x檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果：1、RES、DDP單用或聯(lián)合作用對(duì)人肝門部膽管癌細(xì)胞FRH-0201均有抑制作用，且呈劑量、時(shí)間依賴性，同樣濃度下RES對(duì)人肝門部膽管癌細(xì)胞株FRH-0201的抑制作用要強(qiáng)于DDP; RES、DDP聯(lián)合應(yīng)用的細(xì)胞抑制率較二者單獨(dú)作用顯著升.高(P<0.05)。RES作用于人肝門部膽管癌細(xì)胞FRH-020124、48、72

4、 h的IC50分別為55.35、32.84、28.01um01/L。2、RES、DDP單獨(dú)或聯(lián)合作用于人肝門部膽管癌細(xì)胞FRH-0201均可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；RES、DDP聯(lián)合應(yīng)用的誘導(dǎo)凋亡率較二者單獨(dú)作用顯著升高(P<0.05)。3、RES單獨(dú)作用于人肝門部膽管癌細(xì)胞FRH-0201，可出現(xiàn)GO/G1期阻滯。DDP單獨(dú)作用于人肝門部膽管癌細(xì)胞FRH-0201，可出現(xiàn)S期阻滯。二者可以從不同環(huán)節(jié)抑制細(xì)胞增殖。
　　 結(jié)論：l、RES