β-防御素和鮭魚生長激素對(duì)大菱鲆生長及免疫力的影響研究.pdf

1、抗菌肽(Anti-microbialpeptides)是廣泛存在于生物界中具有抗菌活性的一類短肽，在機(jī)體抵抗病原入侵方面起著重要的作用。β-防御素作為抗菌肽的一種，同樣具有免疫防御功能。本文選擇酵母β-防御素、β-防御素及鮭魚生長激素作為飼料添加劑，飼喂大菱鲆，測(cè)定其對(duì)大菱鲆生長（平均體重、平均體重增長率、特定生長率）及免疫力（血細(xì)胞數(shù)、溶菌酶活力、替代途徑補(bǔ)體活力、超氧化物歧化酶活力、相對(duì)免疫保護(hù)率）的影響，得到以下研究結(jié)果:

2、　　 1.酵母β-防御素對(duì)大菱鲆生長及免疫力的影響:以初始體重為20±19的大菱鲆為研究對(duì)象，采用單因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，在基礎(chǔ)飼料中分別添加2.5、10、40ml/kg的酵母β-防御素，在室內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中進(jìn)行為期8周的生長實(shí)驗(yàn)，養(yǎng)殖系統(tǒng)水溫保持在18℃，鹽度為31-33‰，pH7.8-8.2，溶解氧不低于6mg/L。實(shí)驗(yàn)過程中每2周取樣一次，測(cè)定大菱鲆的平均體重、血細(xì)胞數(shù)、溶菌酶活力、替代途徑補(bǔ)體活力和超氧化物歧化酶活力，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用鰻弧菌對(duì)

3、各處理組進(jìn)行攻毒實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，(1)酵母β-防御素對(duì)大菱鲆生長的影響:投喂添加不同濃度的酵母β-防御素飼料的各實(shí)驗(yàn)組大菱鲆平均體重均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），而各實(shí)驗(yàn)組之間無顯著差異（P＞0.05），特定生長率表明酵母β-防御素主要在實(shí)驗(yàn)14d之前對(duì)大菱鲆起促生長作用（P＜0.05），而14d之后作用不明顯（P＞0.05）。(2)酵母β-防御素對(duì)大菱鲆免疫力的影響:投喂添加不同濃度的酵母β-防御素飼料的各實(shí)驗(yàn)組，血細(xì)胞數(shù)量在各個(gè)

4、時(shí)期均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。添加酵母β-防御素的各實(shí)驗(yàn)組對(duì)大菱鲆溶菌酶活力均有顯著提高作用（P＜0.05），隨著時(shí)間的延長，低濃度組（2.5ml/kg組）和高濃度組（40ml/kg組）溶菌酶活力下降，至56天時(shí)2.5ml/kg組和40ml/kg組溶菌酶活力均低于10ml/kg組。添加10ml/kg和40ml/kg酵母β-防御素組的大菱鲆替代途徑補(bǔ)體活力顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，隨著時(shí)間的延長，10ml/kg組大

5、菱鲆替代途徑補(bǔ)體活力高于40ml/kg組，但差異不顯著（P＞0.05）。各處理組在大菱鲆養(yǎng)殖過程中超氧化物歧化酶(SOD)無明顯變化，各組之間也差異不顯著（P＞0.05）。(3)攻毒實(shí)驗(yàn)顯示投喂添加10ml/kg酵母β-防御素飼料的實(shí)驗(yàn)組大菱鲆的累積死亡率顯著低于對(duì)照組和2.5ml/kg組（P＜0.05），也低于40ml/kg組，但差異不顯著（P＞0.05），同時(shí)10ml/kg組相對(duì)免疫保護(hù)率高于2.5ml/kg組和40ml/kg組。<

6、br>　　 2.β-防御素對(duì)大菱鲆生長及免疫力的影響:以初始體重為30±19的大菱鲆為研究對(duì)象，采用單因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，在基礎(chǔ)飼料中分別添加2.5、10、40ml/kg的β-防御素，在室內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中進(jìn)行為期8周的生長實(shí)驗(yàn)，養(yǎng)殖系統(tǒng)水溫保持在18℃，鹽度為31-33‰，pH7.8-8.2，溶解氧不低于6mg/L。實(shí)驗(yàn)過程中每2周取樣一次，測(cè)定大菱鲆的平均體重、血細(xì)胞數(shù)、溶菌酶活力、替代途徑補(bǔ)體活力和超氧化物歧化酶活力，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用鰻弧菌對(duì)各

7、處理組進(jìn)行攻毒實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，(1)β-防御素對(duì)大菱鲆生長的影響:添加β-防御素的實(shí)驗(yàn)組的大菱鲆平均體重均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但各實(shí)驗(yàn)組之間無顯著差異（P＞0.05），特定生長率結(jié)果顯示可以看出酵母β-防御素主要在前14天時(shí)和28天至42天之間對(duì)大菱鲆起促生長作用（P＜0.05），而其他時(shí)間段作用不明顯（P＞0.05）。(2)β-防御素對(duì)大菱鲆免疫力的影響:投喂添加不同濃度的β-防御素飼料的各實(shí)驗(yàn)組，血細(xì)胞數(shù)量在各個(gè)時(shí)期均與

8、對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05），而對(duì)大菱鲆溶菌酶活力均有顯著提高作用（P＜0.05），而且高濃度組（40ml/kg組）溶菌酶活力在實(shí)驗(yàn)前期顯著高于低濃度組（2.5ml/kg組）和中濃度組（10ml/kg組）（P＜0.05），隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，10ml/kg組溶菌酶活力逐漸升高，至56天時(shí)10ml/kg組和40ml/kg組之間溶菌酶活力無顯著差異（P＞0.05）。添加10ml/kg和40ml/kgβ-防御素組的大菱鲆替代途徑補(bǔ)體活力顯

9、著高于對(duì)照組（P＜0.05），而兩者之間差異不顯著（P＞0.05）。各處理組在大菱鲆養(yǎng)殖過程中超氧化物歧化酶(SOD)無明顯變化，各組之間也差異不顯著（P＞0.05）。(3)攻毒實(shí)驗(yàn)顯示投喂添加10ml/kg和40ml/kgβ-防御素飼料的實(shí)驗(yàn)組大菱鲆的累積死亡率顯著低于對(duì)照組和2.5ml/kg組（P＜0.05）。同時(shí)10ml/kg組和40ml/kg組相對(duì)免疫保護(hù)率高于2.5ml/kg組。
　　 3.鮭魚生長激素對(duì)大菱鲆生長及免

10、疫力的影響:以初始體重為5±0.5g的大菱鲆為研究對(duì)象，采用單因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，在基礎(chǔ)飼料中分別添加1、2、3g/kg的鮭魚生長激素，在室內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中進(jìn)行為期8周的生長實(shí)驗(yàn)，養(yǎng)殖系統(tǒng)水溫保持在18℃，鹽度為31-33‰，pH7.8-8.2，溶解氧不低于6mg/L。實(shí)驗(yàn)過程中每2周取樣一次，測(cè)定大菱鲆的平均體重、血細(xì)胞數(shù)、溶菌酶活力、替代途徑補(bǔ)體活力和超氧化物歧化酶活力，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用鰻弧菌對(duì)各處理組進(jìn)行攻毒實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，(1)鮭魚生長激素對(duì)

11、大菱鲆生長的影響:添加2g/kg和3g/kg鮭魚生長激素的實(shí)驗(yàn)組平均體重顯著高于對(duì)照組和1g/kg組（P＜0.05），至42天時(shí)，2g/kg組大菱鲆平均體重及平均體重增長率均高于3g/kg組，但差異不顯著（P＞0.05）。(2)鮭魚生長激素對(duì)大菱鲆免疫力的影響:投喂添加不同濃度的鮭魚生長激素飼料的各實(shí)驗(yàn)組，血細(xì)胞數(shù)量在各個(gè)時(shí)期均與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)，而大菱鲆溶菌酶活力均顯著降低（P＜0.05），隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，各組溶菌

12、酶活力逐步接近，無顯著差異（P＞0.05）。添加3g/kg鮭魚生長激素組的大菱鲆替代途徑補(bǔ)體活力顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），而1g/kg組和2g/kg兩者與對(duì)照組之間差異不顯著（P＞0.05），隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長，各組間大菱鲆替代途徑補(bǔ)體活力趨于接近，至56天時(shí)，各組間無顯著差異（P＞0.05）。各處理組在大菱鲆養(yǎng)殖過程中超氧化物歧化酶(SOD)無明顯變化，各組之間也差異不顯著（P＞0.05）。(3)攻毒實(shí)驗(yàn)顯示投喂添加鮭魚生長激素

13、飼料的各實(shí)驗(yàn)組大菱鲆的累積死亡率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），但各實(shí)驗(yàn)組之際差異不顯著（P＞0.05），同時(shí)對(duì)大菱鲆相對(duì)免疫保護(hù)率均有不同程度的提高作用。
　　 4.β-防御素對(duì)水產(chǎn)主要病原菌抑菌作用的研究:以β-防御素為研究對(duì)象，采用試管兩倍稀釋法，研究β-防御素對(duì)水產(chǎn)主要病原菌的抑菌作用，經(jīng)測(cè)定β-防御素對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、鰻弧菌、溶藻膠弧菌、副溶血弧菌最低抑菌濃度(MIC)分別為4μg/m