銀杏葉提物對(duì)H2O2誘發(fā)再灌注損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　 研究銀杏葉總提取物(GBE)對(duì)H2O2誘發(fā)的再灌注損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,并探討其作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.實(shí)驗(yàn)采用胰酶消化法分離Wistar大鼠乳鼠的心肌細(xì)胞,差速貼壁法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
　　 2.用H2O2損傷心肌細(xì)胞,以此為心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?shí)驗(yàn)組分為6組:正常對(duì)照組;H2O2損傷組;GBE保護(hù)組,加入GBE使其終濃度分別為50、100、150mg·L-1;陽(yáng)性對(duì)照

2、組,加入異搏定。
　　 3.用紫外分光光度計(jì)法、硫代巴比妥酸法、黃嘌呤氧化酶法分別測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Lowry法測(cè)定細(xì)胞線粒體中蛋白含量;測(cè)定線粒體中琥珀酸脫氫酶(SDH)、細(xì)胞色素C氧化酶(CCO)比活力。
　　 4.透射電鏡觀察心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果：
　　 1.與正常對(duì)照組相比,H2O2損傷組LDH溢出量和MD

3、A含量均明顯升高(p＜0.05,p＜0.001),SOD則明顯降低(p＜0.01);SDH和CCO比活力在H2O2損傷組明顯下降(p＜0.001)。透射電子顯微鏡觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷明顯。
　　 2.與H2O2損傷組相比,GBE不同濃度組能減少LDH和MDA的產(chǎn)生,成劑量依賴關(guān)系,其中150mg·L-1GBE組具有明顯的保護(hù)作用(p＜0.001)。GBE不同濃度組能維持SOD活性與H2O2損傷組相比(p＜0.001)、與正常

4、對(duì)照組相比無(wú)明顯變化(p＞0.05)。50、100mg·L1-GBE組SDH及CCO比活力測(cè)定指標(biāo)與正常組相比有不同程度的降低(p＜0.05),與H2O2損傷組相比較活性降低,150mg·L-1GBE實(shí)驗(yàn)組SDH及CCO比活力與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異,與H2O2損傷組相比(p＜0.01)。透射電子顯微鏡觀察顯示GBE保護(hù)組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)無(wú)明顯損傷,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明GBE對(duì)H2O2誘導(dǎo)的再灌注損傷心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用。
　　 結(jié)論：<

5、br>　　 1.100umol·L-1的H2O2能夠引起乳鼠心肌細(xì)胞損傷。此時(shí)心肌組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物明顯增多,心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重,心肌發(fā)生嚴(yán)重再灌注損傷。
　　 2.不同濃度的GBE能明顯降低心肌細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng),維持細(xì)胞中線粒體正常的呼吸及能量代謝。
　　 3.GBE對(duì)缺血再灌注損傷心肌細(xì)胞具有很好的保護(hù)作用,保護(hù)效果優(yōu)于異搏定。其保護(hù)機(jī)制與其抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)進(jìn)行和增加心肌能量?jī)?chǔ)備有關(guān)。
　　 4.