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文檔簡介
1、背景與目的:腫瘤的血管發(fā)生與腫瘤的生長關(guān)系密切。在腫瘤血管發(fā)生的分子機(jī)制的研究中,DLL4的作用日益受到關(guān)注。研究認(rèn)為,腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞高表達(dá)DLL4,DLL4可能在血管的生長過程中調(diào)節(jié)著血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化增殖,從而達(dá)到控制血管生長的作用。本實(shí)驗(yàn)擬檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞是否表達(dá)DLL4以及DLL4的兩個(gè)下游基因HEY1和HEY2。研究DLL4對血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響,探索DLL4在腫瘤血管發(fā)生和生長中的作用。 材料與方法:培養(yǎng)人微血管
2、內(nèi)皮細(xì)胞(HMEC),MTT法檢測HMEC細(xì)胞增殖,提取HMEC細(xì)胞總RNA,用RT—PCR的方法檢測HMEC細(xì)胞DLL4mRNA、HEY1mRNA、HEY2mRNA的表達(dá),采用RNA干擾方法觀察HMEC細(xì)胞DLL4 mRNA表達(dá),對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示,HMEC細(xì)胞表達(dá)DLL4 mRNA、HEY1 mRNA和HEY2mRNA;DLL4 RNA干擾結(jié)果顯示,100nmol/L siRNA DLL4-d
3、uplex組和200nmol/LsiRNA DLL4-duplex組HMEC細(xì)胞DLL4 mRNA的表達(dá)明顯下調(diào),MTT的結(jié)果顯示100nmol/L siRNA DLL4-duplex組和200nmol/L siRNA DLL4-duplex組的HMEC細(xì)胞的吸光度明顯增加,即抑制DLL4能促進(jìn)HMEC細(xì)胞的增殖,表明DLL4抑制HMEC細(xì)胞增殖。 結(jié)論:HMEC細(xì)胞表達(dá)DLL4 mRNA、HEY1 mRNA和HEY2 mRNA
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