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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究survivin過(guò)表達(dá)對(duì)大鼠動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞抗凋亡、增殖、遷移能力的影響。
方法:用腺病毒將survivin載體導(dǎo)入大鼠動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(RAEC),采用PCR和western-blot分別檢測(cè)survivin mRNA及蛋白;采用流式細(xì)胞術(shù)、western-blot、WST-1分別檢測(cè)細(xì)胞周期及細(xì)胞周期素D1(Cyclin D1)及細(xì)胞增殖,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,采用western-blot分別檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白cas
2、pase3、caspase-8;采用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞遷移相關(guān)蛋白基質(zhì)金屬蛋白酶2、9(MMP-2、9)
結(jié)果:survivin轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,細(xì)胞survivin蛋白和核酸表達(dá)水平增高,過(guò)表達(dá)組能顯著抵抗凋亡,轉(zhuǎn)染48h后caspase-3,caspase-8表達(dá)較對(duì)照組降低,cyclin D1表達(dá)增多,轉(zhuǎn)染48h后MMP-2、MMP-9較對(duì)照組顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:survivin的腺
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