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1、目的:了解香煙煙霧提取物(CSE)是否誘導(dǎo)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC)凋亡以及CSE濃度和干預(yù)時(shí)間對(duì)HPMEC凋亡的影響。探究CSE干預(yù)是否影響HPMEC中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體2(VEGFA/VEGFR2)在轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)層面的表達(dá),從而推測(cè)CSE可能通過VEGF/VEGFR2表達(dá)下調(diào)機(jī)制引起HPMEC凋亡參與慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)生發(fā)展過程。
方法:體外培養(yǎng)HPMEC予不同濃度CSE干預(yù)及相同濃度CSE干預(yù)不
2、同時(shí)間長(zhǎng)度后檢測(cè)細(xì)胞凋亡以比較不同組間凋亡率。篩選出最佳干預(yù)濃度和干預(yù)時(shí)間長(zhǎng)度后檢測(cè)CSE干預(yù)后HPMEC中VEGF/VEGFR2 mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)較非干預(yù)組是否存在差異。全部數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,顯著性水平取α=0.05。
結(jié)果:不同濃度CSE(0%,0.5%,1%,2.5%,5%,10%)干預(yù)HPMEC均引起凋亡率高于對(duì)照組(P<0.01),且上述各組間兩兩比較有顯著差異(P<0.01),除0.5%
3、CSE干預(yù)組外,上述其余各組HPMEC壞死率明顯高于對(duì)照組且各組間兩兩比較有顯著差異(P<0.01);相同濃度CSE(1%)干預(yù)不同時(shí)間點(diǎn)(0小時(shí),3小時(shí),6小時(shí),12小時(shí),24小時(shí))均引起HPMEC凋亡率高于對(duì)照組(P<0.01),且上述各組間兩兩比較有顯著差異(P<0.01),CSE干預(yù)不同時(shí)間點(diǎn)均引起HPMEC壞死率高于對(duì)照組(P<0.01),且上述各組間兩兩比較有顯著差異(P<0.01);HPMEC在CSE干預(yù)不同時(shí)間點(diǎn)VEGF
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