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1、 目的:本實驗在體外培養(yǎng)人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),應(yīng)用Matrigel建立穩(wěn)定的血管形成的體外培養(yǎng)體系,來研究炎性因子GM-CSF對誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞血管形成的影響及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的作用,進(jìn)而探討GM-CSF和VEGF與AS斑塊穩(wěn)定性及病變進(jìn)展之間的關(guān)系。 方法:采用改進(jìn)的Jaffe氏培養(yǎng)法進(jìn)行HUVECs培養(yǎng),應(yīng)用Matrigel誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞形成管腔結(jié)構(gòu),從而建立穩(wěn)定的血管形成的體外培養(yǎng)體系,然后施加
2、實驗因素。第一組實驗分為四組,正常對照組(無血清DMEM培養(yǎng)液)和不同濃度rhGM-CSF作用組(rhGM-CSF濃度分別為25、50、100ng/ml),作用48小時。第二組實驗分為三組,選取相同濃度的rhGM-CSF(100ng/ml)作用不同的時間。第三組實驗分為三組,正常對照組(無血清DMEM培養(yǎng)液)、rhGM-CSF(100ng/ml)組、rhGM-CSF(100ng/ml)+VEGF165(10ng/ml)組,作用24h。然
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