廣西兩地異盤(pán)并殖吸蟲(chóng)分子系統(tǒng)發(fā)生研究.pdf

1、目的：通過(guò)研究廣西兩地(靈川、那坡)異盤(pán)并殖吸蟲(chóng)分離株的核糖體DNA第二內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)基因(ITS2)和細(xì)胞色素c氧化酶亞單位I基因(C01)序列，比較分析兩地蟲(chóng)體的基因差異，揭示它們之間的親緣關(guān)系和分類(lèi)學(xué)地位。 方法：采集靈川和那坡兩地的異盤(pán)并殖吸蟲(chóng)囊蚴接種適宜終宿主大鼠，獲得成蟲(chóng)后提取基因組DNA，PCR擴(kuò)增其ITS2和CO1基因序列并測(cè)序。從Genebank檢索到與它們同源性相近的并殖吸蟲(chóng)基因序列，應(yīng)用Megalign軟件

2、對(duì)基因序列進(jìn)行比較和同源性分析，然后用Mega及Phylip軟件以最小進(jìn)化法(ME)、鄰接法(N-J)、最大似然法(ML)、最大簡(jiǎn)約法(MP)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)，其中ME和N-J法用Kimura雙參數(shù)法計(jì)算遺傳距離，自舉檢驗(yàn)副本數(shù)為1000，ML和MP法自舉檢驗(yàn)副本數(shù)為500。 結(jié)果：那坡異盤(pán)并殖吸蟲(chóng)分離株與靈川異盤(pán)并殖吸蟲(chóng)分離株的ITS2基因序列相似度為100％，COl基因序列相似度為97.5％，同源性較高；而那坡與泰國(guó)一個(gè)分離株

3、的ITS2和COl基因序列相似度高達(dá)100％，具有高度同源性。 從ITS2序列系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)來(lái)看，來(lái)自那坡、靈川、越南、泰國(guó)和印度的分離株均處于異盤(pán)并殖吸蟲(chóng)的種群下，但印度分離株是個(gè)相對(duì)獨(dú)立的分枝，親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從COl序列系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)來(lái)看，不同的發(fā)生樹(shù)中那坡分離株均與泰國(guó)、越南分離株的親緣關(guān)系較近，以較高的自舉檢驗(yàn)置信值形成單系群，而靈川分離株的分枝均處在這個(gè)群之外，印度分離株的親緣關(guān)系則更遠(yuǎn)一些。 結(jié)論：那坡分離株與靈川分