參麥注射液對(duì)缺血再灌注損傷兔肺細(xì)胞凋亡及Fas-Fasl基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 探討Fas/Fasl介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路和肺缺血再灌注損傷的關(guān)系及參麥注射液對(duì)細(xì)胞凋亡及Fas/Fasl基因表達(dá)的影響，為肺保護(hù)提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.實(shí)驗(yàn)分組：健康日本大耳白兔30只，隨機(jī)將實(shí)驗(yàn)兔分為3組：(1)假手術(shù)對(duì)照組(C組10只)，麻醉后左側(cè)開胸，左肺門游離后留置阻斷帶，觀察4h；(2)肺缺血－再灌注組(ischemia－reperfusion，I-R組10只)，手術(shù)同C組，

2、結(jié)扎阻斷帶，阻斷肺門1h后開放再灌注3h；(3)參脈注射液組(SM組10只)，于肺缺血前20分鐘耳緣靜脈注射參脈注射液15ml/kg，余同I－R組。
　　 2.采用兔單側(cè)原位缺血再灌注模型。
　　 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)束取部分左肺組織測濕/干重比(W/D)；采用原位末端標(biāo)記法檢測肺組織凋亡指數(shù)(AI)；原位雜交測定肺組織Fas/Fasl的表達(dá)；光鏡、電鏡下觀察肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，并測定肺組織損傷組織學(xué)定量評(píng)價(jià)指標(biāo)(IQA)。

3、>　　 結(jié)果：
　　 1.I－R組和SM組AI、W/D及IQA值明顯高于C組(P<0.05或P<0.01)；SM組AI、W/D及IQA值顯著低于I－R組(P<0.05和P<0.01)。
　　 2.C組見少量細(xì)胞凋亡；IR組肺組織細(xì)胞AI明顯高于C組(P<0.01)；SM組與IR組比較明顯下降(P<0.01)。凋亡細(xì)胞主要為肺泡上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞。C組：肺組織肺內(nèi)未見明顯棕黃色陽性信號(hào)，即Fas－mRNA和FasL－

4、mRNA的表達(dá)不明顯；I－R組與SM組：Fas-mRNA和FasL－mRNA的表達(dá)明顯強(qiáng)于C組(P<0.01或P<0.05)；SM組Fas-mRNA和FasL－mRNA的表達(dá)顯著弱于I-R組(均P<0.01)。陽性細(xì)胞主要分布于肺血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞及細(xì)支氣管上皮細(xì)胞，間質(zhì)細(xì)胞也有少量表達(dá)。
　　 3.各參數(shù)間相關(guān)性分析：AI與Fas及FasL原位雜交吸光度值之間呈明顯正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.8448和0.8148，P

5、均<0.01；AI與W/D及IQA值之間均呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.7625和0.7559，P均<0.01；W/D與Fas及FasL原位雜交吸光度值之間呈明顯的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.7458、和0.8245，P均<0.01；IQA與Fas及FasL原位雜交吸光度值之間均呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.8195及0.843，P均<0.01。
　　 4.光鏡檢查：C組肺間質(zhì)及肺泡較完整，未見炎癥細(xì)胞浸潤；I-R組肺不

6、張伴肺氣腫，肺間質(zhì)增寬并有水腫，炎癥細(xì)胞浸潤，肺泡內(nèi)有較多血液成分滲出，損傷明顯；SM組肺間質(zhì)輕度水腫，少量炎癥細(xì)胞浸潤，肺泡較完整。
　　 5.透射電鏡檢查：C組毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，連接緊密，基底膜完整，線粒體嵴清楚，板層小體數(shù)量未見改變，微絨毛完整。I－R組肺內(nèi)微小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞胞漿內(nèi)吞飲小泡增多，線粒體水腫甚至空泡化，內(nèi)膜下基底膜水腫、空泡變性，內(nèi)皮細(xì)胞懸空，毛細(xì)血管腔內(nèi)PMN堵塞，Ⅱ型上皮細(xì)胞線粒體腫脹，板層小體減少

7、。SM組肺微小動(dòng)脈及毛細(xì)血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)基本正常，連接緊密，基底膜基本完整，線粒體結(jié)構(gòu)基本正常，少數(shù)有水腫，毛細(xì)血管內(nèi)PMN少，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯異常，微絨毛無明顯脫落，線粒體腫脹不明顯，板層小體無明顯減少，肺泡間質(zhì)內(nèi)未見明顯的PMN浸潤。
　　 結(jié)論：1.肺組織Fas/Fasl介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路可能在肺缺血再灌注損傷中起重要作用；
　　 2.缺血再灌注可使肺組織Fas/Fasl基因表達(dá)上調(diào)，F(xiàn)as/Fasl基因