大鼠下丘腦室旁核H-,3-受體調(diào)控哮喘的機制研究.pdf

1、[目的]探討大鼠下丘腦室旁核(PVN)內(nèi)組胺H3受體對哮喘發(fā)作的調(diào)控作用及可能機制。 [材料與方法]健康雄性SD大鼠，腹腔注射卵蛋白(ovalbumin，OA)制備哮喘模型。采用中樞立體定位及微量注射技術(shù)在哮喘大鼠PVN內(nèi)微量注射組胺H3受體激動劑R-(α)-甲基組胺(R-(α)-methylhistamine，MeHA)或H3受體拮抗劑thioperamidemaleate(Thio)，正常大鼠在相同部位注射等量NS作為對照。

2、Powerlab/400生物信號采集系統(tǒng)記錄膈肌肌電活動和肺功能；高效液相色譜法檢測PVN內(nèi)組胺含量；放射免疫分析方法檢測正中隆起中促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasinghormone，CRH)和外周血中促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenoeorticotropichormone，ACTH)、皮質(zhì)酮(corticosterone，CORT)含量；酶聯(lián)免疫吸附法檢測腦組織和血漿interleukin-10(IL

3、-10)含量；免疫組織化學(xué)方法、葡萄糖氧化酶-DAB-鎳染色和計算機圖像分析等技術(shù)檢測肺內(nèi)神經(jīng)源性炎性介質(zhì)降鈣素基因相關(guān)肽樣免疫反應(yīng)(calcitoningeneralatedpeptide-likeimmunoreactive，CGRP-IR)陽性物的含量和c-Fos蛋白在海馬的表達。 [結(jié)果]1)與正常對照組相比，靜脈注射OA生理鹽水溶液激發(fā)哮喘發(fā)作后，呼吸功能指標明顯改變，出現(xiàn)哮喘活動表現(xiàn)，即：膈肌放電頻率、呼氣時程/吸氣

4、時程和氣道阻力增加，膈肌放電積分幅值和肺順應(yīng)性減小；哮喘急性發(fā)作后，哮喘大鼠PVN內(nèi)組胺含量明顯增高；支氣管、肺內(nèi)有較密集的CGRP-IR陽性物分布；外周血中CORT、ACTH及正中隆起組織中CRH的含量明顯降低；海馬c-Fos表達增加；腦組織及外周血IL-10含量下降。上述各指標與正常對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。2)激發(fā)哮喘發(fā)作后，哮喘大鼠PVN內(nèi)微量注射組胺H3受體激動劑MeHA，與OA+NS組相比，膈肌放電頻率、呼氣時程/吸氣

5、時程和氣道阻力下降，膈肌放電積分幅值和肺順應(yīng)性增加，差異有顯著性；PVN內(nèi)組胺含量下降(P＜0.01)；CORT、ACTH及CRH含量明顯增加(P＜0.01)；海馬c-Fos表達減少(P＜0.01)；IL-10含量增高(P＜0.01)；支氣管、肺內(nèi)CGRP-IL陽性物數(shù)量顯著減少(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。3)激發(fā)哮喘發(fā)作后，哮喘大鼠PVN內(nèi)微量注射組胺H3受體拮抗劑Thio，上述效應(yīng)均被阻斷，與OA+MeHA組相比，差異均有統(tǒng)