大鼠下丘腦室旁核神經(jīng)免疫調(diào)控的形態(tài)學基礎(chǔ)探討.pdf

1、越來越多的研究表明下丘腦室旁核(PVH)參與免疫功能的調(diào)控。PVH可以通過神經(jīng)及體液的聯(lián)系與免疫系統(tǒng)相互聯(lián)系，但PVH與淋巴結(jié)之間是否有直接的神經(jīng)環(huán)路聯(lián)系卻未見報道。外周免疫信號可觸發(fā)PVH神經(jīng)元內(nèi)部一些信號傳導分子表達，但有關(guān)信號傳導途徑卻未完全闡明。本文以LPS刺激大鼠作為免疫激發(fā)狀態(tài)動物模型，對此進行了進一步的研究。 本文包括三個部分：1．采用假狂犬病毒(PRV)跨神經(jīng)元追蹤方法研究腸系膜淋巴結(jié)注射PRV大鼠PVH內(nèi)

2、PRV感染神經(jīng)元的分布，同時采用免疫組化方法研究腹腔注射細菌脂多糖(LPS)后大鼠PVH c-fos表達的變化。此部分工作旨在了解PVH是否通過與淋巴結(jié)間直接的神經(jīng)環(huán)路聯(lián)系對免疫功能進行調(diào)控。2．采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)，免疫組織化學(單標)方法研究LPS注射后PVH內(nèi)nNOS和IEGs(FOS和JUN)的表達是否發(fā)生改變，采用免疫組織化學(雙標)方法研究nNOS和IEGs之間是否有相互的聯(lián)系。3．采用放射免疫分析方法研

3、究LPS對大鼠外周血及下丘腦中TNF-α的表達的影響，采用原位雜交方法研究LPS對大鼠下丘腦室旁核內(nèi)NF-κB表達的影響。第二、三部分工作旨在了解外周的免疫信號到達下丘腦室旁核后通過何種信號分子及信號傳導途徑激活下丘腦室旁核神經(jīng)元從而調(diào)節(jié)機體的免疫應(yīng)答。 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 1．腸系膜淋巴結(jié)注射PRV96小時后在PVH內(nèi)觀察到被PRV標記的 陽性神經(jīng)元，這些神經(jīng)元分布在腹腔注射LPS后PVH內(nèi)FOS陽性 細胞數(shù)目增多的區(qū)

4、域內(nèi)。此結(jié)果提示：PVH與淋巴結(jié)間存在著直 接的神經(jīng)環(huán)路聯(lián)系。PVH可能通過直接的神經(jīng)環(huán)路聯(lián)系對淋巴結(jié) 的免疫功能進行調(diào)控，成為免疫與腦相互聯(lián)系的重要途徑之一。 2．LPS刺激后大鼠PVH內(nèi)nNOS和nNOS mRNA的吸光度(A)值顯著增高(P<0.01，P<0.05)，F(xiàn)OS與JUN陽性細胞數(shù)量顯著增加(P<0.01)，PVH內(nèi)部分神經(jīng)元同時表達nNOS和FOS。此結(jié)果提示：外周的免疫信號到達下丘腦室旁核后可能通過NO和

5、(或)IEGs途徑激活下丘腦室旁核神經(jīng)元，從而參與調(diào)節(jié)免疫功能。 3．LPS可使大鼠血漿及下丘腦組織中TNF-α濃度及PVH內(nèi)NF-KBmRNA的吸光度(A)值顯著增高(P<0.05，P<0.01)。此結(jié)果提示：外周的免疫信號到達下丘腦室旁核后可能通過TNF-a——NF-KB途徑激活下丘腦室旁核神經(jīng)元，從而參與調(diào)節(jié)免疫功能。 本文工作進一步證實——PVH為免疫調(diào)節(jié)的高級整合中樞。PVH可通過直接的神經(jīng)環(huán)路與免疫系統(tǒng)相互聯(lián)