青島地區(qū)淋巴瘤中EB病毒編碼基因EBNA1多態(tài)性研究.pdf

1、目的：EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)與人類淋巴瘤的發(fā)生密切相關(guān)，其分布具有一定的地域性和人群傾向性，除環(huán)境因素和遺傳因素外，是否存在與EBV陽性淋巴瘤相關(guān)的EBV基因變異一直是倍受關(guān)注。本研究采用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction，PCR)結(jié)合DNA測序技術(shù)檢測山東青島地區(qū)EBV陽性淋巴瘤組織中EBV核抗原1(Epstein-Barr virus nuclear antigen1,

2、EBNA1)編碼基因序列，旨在探討EBNA1編碼基因序列變異在淋巴瘤發(fā)生中的意義，明確其變異是具有地域性抑或腫瘤特異性。
　　方法：采用原位雜交技術(shù)檢測山東省青島市622例淋巴瘤患者腫瘤組織中EBV編碼的小RNA1(EBV-encoded small RNA1,EBER1)以篩選EBV陽性淋巴瘤標(biāo)本，巢式PCR結(jié)合DNA測序檢測EBV陽性淋巴瘤標(biāo)本中EBNA1編碼基因多態(tài)性。應(yīng)用DNAStar軟件對EBNA1編碼基因序列檢測結(jié)果進(jìn)

3、行對比分析，與EBV標(biāo)準(zhǔn)株序列比較，根據(jù)EBNA1蛋白487位氨基酸(AA)的變異情況分型；并根據(jù)EBNA3C基因的缺失序列采用PCR技術(shù)對EBV陽性淋巴瘤標(biāo)本進(jìn)行EBV1/2分型。
　　結(jié)果：①622例淋巴瘤中共有110例檢測到EBER1陽性信號，陽性率為17.68％?；羝娼鹆馨土?Hodgkin's lymphoma,HL)的陽性率為33.33%(35/105)，NK/T細(xì)胞淋巴瘤的陽性率為78.67%(59/75)，彌漫大B

4、細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma，DLBCL)的陽性率為1.34%(5/372)和T細(xì)胞淋巴瘤的陽性率為15.71%(11/70)。②EBNA1根據(jù)其C端487位點(diǎn)氨基酸的變化及其它共有突變可分為5種亞型，本研究共檢測到4種亞型，包括V-val變異型，原型P-thr，V-Leu變異型以及P-ala原型，檢出率分別為67.3%(74/110)，15.5%(17/110)，3.6%(4/110)和10.

5、9%(12/110)。③統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，4種EBNA1亞型在淋巴瘤組織中的分布無顯著性差異(P=0.383)；與EBV相關(guān)胃癌(EBV-associated gastric carcinoma，EBVaGC)、鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)及健康攜帶者咽漱液(throat washing,TW)相比，EBNA1亞型的分布也無顯著性差異(P>0.05)。④4種淋巴瘤組織中1型EBV、2型EBV以及1+2

6、混合型EBV的分布沒有顯著不同(P=0.089)，而淋巴瘤分別與NPC，EBVaGC和TWs比較EBV分型均有顯著性差異(P=0.002，P=0.007，P=0.001)。根據(jù)EBV1/2分型將淋巴瘤分為3組，即type1，type2和type1+2，3組中EBNA1亞型V-val，P-thr，V-leu和P-ala的分布沒有顯著不同(P=0.553)。
　　結(jié)論：①EBV陽性淋巴瘤標(biāo)本共檢測到V-val，P-thr，V-Leu和

7、P-ala4種EBNA1亞型，V-val是青島地區(qū)淋巴瘤中最為常見亞型，由于該亞型同時(shí)也是亞洲地區(qū)最常見的亞型，而此結(jié)果與其它地區(qū)的相關(guān)報(bào)道不同，表明 V-val亞型呈地域相關(guān)性。②青島地區(qū)EBV陽性淋巴瘤、NPC、EBVaGC組織和EBV健康攜帶者TWs中，以及4種EBV陽性淋巴瘤間EBNA1亞型的分布均無顯著性差異，表明EBNA1亞型不具有腫瘤特異性，在淋巴瘤的發(fā)生中不具有選擇傾向性，進(jìn)一步支持其地域相關(guān)性特點(diǎn)。③與NPC，EBVa