高糖環(huán)境中單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞相互作用對MT1-MMP表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究高糖環(huán)境下內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞的相互作用對于MT1-MMP表達(dá)的影響。 方法：用密度梯度離心法分離健康成人外周血單核細(xì)胞，分別在不同葡萄糖濃度下(高糖30mmol/L，對照5.5mmol/L)條件下，將單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞系EVC-304單獨(dú)培養(yǎng)、混合培養(yǎng)和隔離共同培養(yǎng)(兩種細(xì)胞用0.45-μm的微孔濾器隔離)24小時(shí)后，將混合培養(yǎng)組的單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞分離，然后采用半定量RT-PCR法分別檢測干預(yù)后單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞MT

2、1-MMPmRNA的表達(dá)。將單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞分別在高糖和對照環(huán)境混合培養(yǎng)24h后，測定單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附。 結(jié)果：(1)單核細(xì)胞在高糖和對照環(huán)境中單獨(dú)培養(yǎng)，以及對照環(huán)境中隔離共同培養(yǎng)24h，均未檢測到MT1-MMP的表達(dá)。單核細(xì)胞在高糖和對照環(huán)境中與內(nèi)皮細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí)以及高糖隔離共同培養(yǎng)條件下，其MT1-MMP表達(dá)顯著增高。且高糖混合培養(yǎng)組的MT1-MMP表達(dá)增加最為顯著(P＜0.05)。(2)高糖單獨(dú)培養(yǎng)組內(nèi)皮細(xì)胞MT

3、1-MMP的表達(dá)較對照單獨(dú)培養(yǎng)組內(nèi)皮細(xì)胞減低(P＜0.05)。高糖混合培養(yǎng)組和高糖隔離共同培養(yǎng)組內(nèi)皮細(xì)胞MT1-MMP表達(dá)均較單獨(dú)培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞均顯著增高(P＜0.05)，且高糖混合培養(yǎng)組內(nèi)皮細(xì)胞MT1-MMP表達(dá)顯著高于高糖隔離共同培養(yǎng)組(P＜0.05)。對照環(huán)境各組間內(nèi)皮細(xì)胞MT1-MMP的表達(dá)無顯著性差異。(3)在高糖環(huán)境中孵育24h后，單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附率較對照組顯著增高(P＜0.05)。 結(jié)論：(1)高糖未引起單