急性髓細胞白血病中miR-155、SHIP1及AKT的表達及臨床意義.pdf

1、研究目的：
　　檢測急性髓細胞白血病(AML)患者骨髓單個核細胞（BMMCs）中miR-155及SHIP1、AKT mRNA的表達，分析miR-155及SHIP1、AKT在急性髓細胞白血病患者中的臨床意義，初步探討miR-155及PI3K/AK T信號通路在AM L發(fā)病機理中的作用，為miR-155的靶點治療提供理論基礎。
　　研究方法：
　　1、收集急性髓細胞白血病患者骨髓標本80例，其中初治組46例、緩解組34例；

2、對照組11例，為缺鐵性貧血患者。
　　2、采用實時熒光定量PCR方法分別檢測AML患者骨髓標本中miR-155和內(nèi)參基因U6及SHIP1、AKT和內(nèi)參基因GAPDH mRNA的表達水平。運用相對定量法計算miR-155及SHIP1、AKT mRNA的相對表達量，計算公式如下：目的基因相對表達量=2-ΔCt×102。
　　3、應用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料呈非正態(tài)分布，用中位數(shù)描述，采用Mann

3、-Whitney U檢驗，相關性分析行Spearman相關性檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗。檢驗水準取α=0.05，選擇 p＜0.05為結果有統(tǒng)計學意義。
　　實驗結果：
　　1、AML患者BMMCs中miR-155相對表達水平在初治組4.2931（2.1642～8.8388）及緩解組3.6853（2.3697～5.2406）均明顯高于對照組2.5190（0.9848～4.9360），P值分別為0.001和0.004，差異均具有

4、統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；初治組miR-155的表達水平較緩解組也明顯增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.022）。
　　2、AML患者 BMMCs中miR-155相對表達水平在預后中等組4.3587（2.3519～8.8388）、不良組5.8910（3.2193～7.9801）均明顯高于預后良好組3.4706（2.1642～5.2193），P值分別為0.036、0.022，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；預后中等組與不良組

5、之間差異無統(tǒng)計學意義（P=0.174）。
　　3、按照34例初治患者miR-155的中位表達水平3.9656將患者分為高表達組（miR-155表達≥3.9656）與低表達組（miR-155表達＜3.9656），結果顯示高表達組與低表達組初次誘導緩解率分別為88.9％、56.3%，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.636，P=0.031）；且化療后未完全緩解患者初治時的miR-155表達水平5.3700（2.9360～8.8388）明顯高

6、于化療后達完全緩解患者初治時的miR-155表達水平3.9012（2.1642～7.9801），差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.005）。
　　4、AM L初治組中miR-155相對表達水平與患者的年齡、骨髓原始細胞比例、外周血白細胞計數(shù)、外周血血紅蛋白計數(shù)、外周血血小板計數(shù)均無明顯相關性（P＞0.05）。
　　5、AML患者 BMMCs中SHIP1mRNA相對表達水平在初治組為0.9083（0.0137～2.8756），緩解組

7、為1.8597（0.6848～4.2986），對照組為1.9740（0.3696～4.4502）；緩解組及對照組均明顯高于初治組，P值分別為0.002和0.005，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；緩解組與對照組之間差異無統(tǒng)計學意義（P=0.510）。
　　6、AML患者BMMCs中AKT mRNA相對表達水平在AML初治組為4.5486（2.1105～8.2922）、緩解組為4.1122（1.6328～8.0067）、對照組

8、為4.2691（1.7854～6.4944），組間兩兩比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　7、初治組中miR-155與SHIP1 mRNA相對表達水平存在負相關（r=-0.354，p=0.016），SHIP1與 AKT mRNA相對表達水平也存在負相關（r=-0.398，p=0.006）；緩解組中miR-155與SHIP1 mRNA相對表達水平存在正相關（r=0.590，p=0.001），SHIP1與AKT mRNA相對

9、表達水平無明顯相關性（r=-0.216，p=0.270）；對照組中miR-155與 SHIP1 mRNA相對表達水平無明顯相關性（r=-0.145，p=0.670），SHIP1與AKT mRN A相對表達水平存在正相關（r=0.609，p=0.047）。
　　結論：
　　1、miR-155在AML患者骨髓單個核細胞中呈高表達，其表達水平與疾病狀態(tài)有關。
　　2、miR-155的表達水平與 AML預后相關，預后中等組及不

10、良組顯著高于預后良好組。miR-155表達水平與AML臨床療效密切相關，miR-155高表達組患者的緩解率較低。
　　3、miR-155與骨髓原始細胞比例，外周血白細胞、血紅蛋白和血小板計數(shù)以及年齡無明顯相關性。
　　4、SHIP1 mRNA在AML患者骨髓單個核細胞中呈低表達。AKT mRNA在AML患者骨髓單個核細胞中表達水平無明顯變化。
　　5、AML初治組中miR-155與 SHIP1mRNA表達及SHIP1m