小麥感染藍(lán)矮病植原體細(xì)胞病理學(xué)及幾種防御酶活性變化.pdf

1、小麥藍(lán)矮病(Wheat Blue Drawf)是由條沙葉蟬(Psammotettix st riatus L．)專(zhuān)化性傳播的小麥植原體(Phytoplasma)病害，目前僅在中國(guó)發(fā)生報(bào)道。該病主要發(fā)生在西北干旱、半干旱地區(qū)的晚熟冬麥區(qū)，近年逐步向南部中熟高產(chǎn)麥區(qū)蔓延，是當(dāng)前西北干旱麥區(qū)間作套種及麥草覆蓋區(qū)的主要病害之一。 本研究分析了不同抗性小麥品種受小麥藍(lán)矮病植原體感染后，在細(xì)胞學(xué)水平發(fā)生的變化及病程相關(guān)酶類(lèi)活性變化；利用熒光

2、顯微鏡技術(shù)觀察小麥及介體內(nèi)植原體，并比較兩種切片技術(shù)的檢測(cè)效果及優(yōu)缺點(diǎn)。主要研究結(jié)果如下： 通過(guò)觀察接種小麥癥狀表現(xiàn)發(fā)現(xiàn)，小麥藍(lán)矮病的潛育期長(zhǎng)短因品種抗性而異，感病品種潛育期為12d左右，抗病品種為18d左右。 利用引物secYF/secYR．，對(duì)在不同感病時(shí)期的不同品種病株體內(nèi)總DNA進(jìn)行植原體SecY基因擴(kuò)增，檢測(cè)結(jié)果顯示：感病品種小麥6號(hào)在接種后15d就可以檢測(cè)到植原體特異性條帶，3個(gè)抗病品種在接種21d才能檢測(cè)到

3、特異性條帶。 DAPI熒光染色結(jié)果顯示：無(wú)論石蠟切片還是冰凍切片，在病葉韌皮部篩管組織及其薄壁細(xì)胞和帶毒蟲(chóng)唾液腺中均可以觀察到特異性熒光，呈藍(lán)白色亮點(diǎn)、短粗亮線及小云片狀亮塊，而健康葉片和無(wú)毒蟲(chóng)切片中觀察不到特異性熒光；同時(shí)發(fā)現(xiàn)冰凍切片中發(fā)出的熒光較石蠟切片強(qiáng)，病葉縱切片較橫切片檢測(cè)到植原體的幾率更高。這些結(jié)果證明冰凍切片結(jié)合：DAPI熒光染色技術(shù)是一種快速有效的小麥藍(lán)矮病的早期診斷和檢測(cè)技術(shù)。 透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)：在小麥

4、病株葉脈韌皮部篩管細(xì)胞及薄壁細(xì)胞內(nèi)有大量典型的植原體，多以包含體的形式存在；隨著植原體的侵入，寄主細(xì)胞發(fā)生了一系列的超微結(jié)構(gòu)病變：葉綠體膨脹畸形，部分葉綠體外膜破裂、基質(zhì)流失、基粒降解，出現(xiàn)大量的淀粉粒和嗜餓顆粒：部分細(xì)胞核降解，核膜破裂、核質(zhì)流失甚至核仁分散消失；線粒體在數(shù)量上有所增加，部分線粒體嵴出現(xiàn)降解。在健康植株葉片中未發(fā)現(xiàn)以上病變。植原體的侵染使抗病品種的過(guò)氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PLA)三種