發(fā)酵溫度對(duì)有效霉素生物合成的影響.pdf

1、有效霉素又名井岡霉素,是一種由吸水鏈霉菌產(chǎn)生的得到廣泛應(yīng)用的重要抗真菌病害農(nóng)用抗生素。發(fā)酵溫度是影響發(fā)酵過(guò)程的一種重要因素,但是有關(guān)發(fā)酵溫度對(duì)抗生素發(fā)酵過(guò)程中基因和酶層次的研究十分有限。本研究以吸水鏈霉菌5008發(fā)酵有效霉素為例,詳細(xì)考察了在不同溫度發(fā)酵產(chǎn)生有效霉素A的過(guò)程,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵溫度在35oC與37oC之間產(chǎn)量存在溫度響應(yīng)閾值。當(dāng)高于溫度閾值時(shí),發(fā)酵產(chǎn)量顯著高于較低溫度的發(fā)酵產(chǎn)量,同時(shí)發(fā)酵的早期蛋白合成和糖消耗速率高。本研究進(jìn)一步利

2、用qRT-PCR測(cè)定了不同發(fā)酵溫度下發(fā)酵前期,中期和后期三個(gè)階段的樣品中有效霉素A生物合成必需的8個(gè)基因所在的3個(gè)操縱子轉(zhuǎn)錄水平。研究發(fā)現(xiàn)在閾值溫度下valABC, valKLMN和valG轉(zhuǎn)錄水平迅速提高,其中valKLMN最為顯著。同時(shí)磷酸戊糖途徑中的6-磷酸葡萄糖脫氫酶和有效霉素生物合成ValG酶活性測(cè)定表明,較高發(fā)酵溫度下細(xì)胞在發(fā)酵前期6-磷酸葡萄糖脫氫酶和ValG都具有更高的酶活。論文還通過(guò)黃色熒光蛋白原位跟蹤溫度對(duì)valG表