高鐵血紅素通過(guò)抑制鈣激活中性蛋白酶對(duì)抗心肌缺血再灌注損傷.pdf

1、背景:
　　急性心肌梗死發(fā)病率高，并且死亡率也高，臨床常用的溶栓療法和經(jīng)皮穿刺腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)，一方面挽救了大量瀕臨死亡的心肌，另一方面卻又引起了不容忽視的心肌缺血再灌注損傷。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，心肌缺血再灌注時(shí)，由于鈣超載導(dǎo)致鈣蛋白酶這種鈣依賴(lài)性蛋白酶(calpain)的激活，是導(dǎo)致心肌死亡、功能受損的主要原因。
　　高鐵血紅素可減輕心肌缺血再灌注損傷、降低氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的血管功能障礙。雖然已證實(shí)高鐵血紅素具有心肌保護(hù)作用，但

2、其作用機(jī)制是否通過(guò)影響再灌注時(shí)心肌calpain的活化，還不明了。
　　目的:
　　本實(shí)驗(yàn)旨在大鼠急性心肌缺血再灌注模型上，觀察高鐵血紅素是否通過(guò)抑制calpain對(duì)抗心肌缺血再灌注損傷，并初步探討其可能的機(jī)制。
　　方法:
　　64只雄性SD大鼠隨機(jī)8組，分別是:假手術(shù)組、缺血再灌注組、MDL28170+缺血再灌注組、單純MDL28170組、高鐵血紅素+缺血再灌注組、單純高鐵血紅素組、鋅原卟啉Ⅸ+缺血再灌注組(

3、ZnPP+IR)、單純鋅原卟啉Ⅸ組(ZnPP)，每組8只。采用大鼠離體心臟Langendorff灌流模型，心臟缺血再灌注后，觀察左室發(fā)展壓(left ventricular developed pressure，LVDP)，測(cè)定心肌梗死面積、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)的釋放量。檢測(cè)血紅素氧化酶(hemeoxygenase，HO)、calpain和caspase3活性。Western blot觀察ca

4、lpastatin蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)Calpain在缺血再灌注心肌損傷中的作用與假手術(shù)組比，心肌缺血再灌注后，calpain、caspase3活性明顯增高。而在缺血前和再灌注期給予calpain的抑制劑MDL28170，可抑制缺血再灌注誘導(dǎo)的LDH釋放量增加，增高LVDP，縮小心肌梗死面積。
　　(2)高鐵血紅素對(duì)缺血再灌注心臟各指標(biāo)的影響與單純?nèi)毖俟嘧⒔M相比，大鼠預(yù)先給予高鐵血紅素后，心臟HO-1活

5、性增加，calpain和caspase3活性下降。同時(shí)，LDH釋放量減少，LVDP明顯增高，心肌梗死面積縮小。
　　(3)鋅原卟啉Ⅸ對(duì)高鐵血紅素保護(hù)作用的影響實(shí)驗(yàn)前24h給予HO-1的抑制劑鋅原卟啉Ⅸ(ZnPP)后，能對(duì)抗高鐵血紅素的保護(hù)作用，表現(xiàn)在，與高鐵血紅素相比，鋅原卟啉Ⅸ組calpain和Caspase3活性增高，LDH釋放量明顯增加，LVDP明顯下降，心肌梗死面積增大。
　　(4)Calpastatin在高鐵血紅素