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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究在乳腺癌細(xì)胞中PRMT2對(duì)CCND1的調(diào)節(jié),并構(gòu)建CCND1啟動(dòng)載體,并在其基礎(chǔ)上構(gòu)建其突變載體,研究PRMT2調(diào)控CCND1的分子機(jī)制。
方法:培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞并分成4組,分別為pcDNA3.1/PRMT2/-E2、pcDNA3.1/Scramble/-E2、 pcDNA3.1/PRMT2/+E2、pcDNA3.1/Scramble/E2。在雌激素處理后,用胰酶消化細(xì)胞,提取蛋白及 RNA,檢測(cè) PRMT2、CCND
2、1、c-myc、ERα的表達(dá),構(gòu)建CCND1載體,并在其基礎(chǔ)上,分別構(gòu)建ERE位點(diǎn)及AP-1位點(diǎn)的突變載體,明確PRMT2在乳腺癌細(xì)胞中對(duì)CCND1的調(diào)節(jié)機(jī)制。
結(jié)果:
1、mRNA分析結(jié)果顯示:在乳腺癌細(xì)胞中,PRMT2高表達(dá)后,CCND1表達(dá)明顯下調(diào),約為空載體轉(zhuǎn)染組一半,加入激素處理后,這種影響更加明顯(p<0.05)。2、蛋白分析結(jié)果顯示:在乳腺癌細(xì)胞中,PRMT2高表達(dá)后,CCND1表達(dá)明顯下調(diào),約為空載體
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