牛泡沫病毒BTas蛋白乙酰化修飾初步研究.pdf

1、牛泡沫病毒(Bovine Foamy Virus)屬反轉(zhuǎn)錄病毒科泡沫病毒亞科泡沫病毒屬,具有廣泛的宿主范圍,其在體外雖可使細胞發(fā)生強烈病變,在體內(nèi)卻無任何臨床病癥。BFV基因組在env與3’LTR之間存在若干編碼調(diào)控蛋白的讀碼框,前期工作證明ORF-1編碼病毒的反式激活因子BTas。BTas調(diào)節(jié)BFV的兩類啟動子-LTR和IP起始的轉(zhuǎn)錄,對于BFV的病毒復(fù)制至關(guān)重要。 乙酰化是體內(nèi)蛋白質(zhì)重要的修飾形式,作用于組蛋白的N末端或者其

2、它蛋白的ε-賴氨酸,對轉(zhuǎn)錄、DNA結(jié)合能力、核定位等功能產(chǎn)生深遠影響。本室前期工作發(fā)現(xiàn),BTas蛋白與乙?；蜃觩300有相互作用,二者可共定位于細胞核,推測BTas可能借助乙酰化機制行使其反式激活功能。 本文對BTas乙?；揎椆δ苓M行初步探討。用去乙?；敢种苿㏕SA處理細胞,發(fā)現(xiàn)BTas的激活增強,說明BTas行使功能同乙酰化相關(guān)；制備兔源抗體,確定與BTas相互作用的乙?；蜃觩300可使BTas乙?；?且p300對BT

3、as激活BFV LTR和IP有促進作用；p300發(fā)揮乙酰轉(zhuǎn)移酶活性的重要區(qū)域,HAT區(qū)缺失實驗證實HAXI區(qū)是增強BTas轉(zhuǎn)錄激活活性的必需區(qū)；將BTas結(jié)合結(jié)構(gòu)域內(nèi)的12個賴氨酸逐一突變?yōu)榫彼?瞬時轉(zhuǎn)染實驗初步顯示BTas介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活的重要位點為第36、66、74、109和110位賴氨酸,它們可能是p300乙?；悬c；此外還發(fā)現(xiàn)BFV的Bet蛋白亦可被p300乙?；Ｉ鲜鼋Y(jié)果說明BTas行使自身功能需要細胞內(nèi)乙?；篙o助,乙?；揎?/p>