發(fā)酵產(chǎn)L-天冬氨酸的初步研究.pdf

1、L-天冬氨酸在醫(yī)藥工業(yè)、食品、農(nóng)業(yè)和生化試劑等有廣泛用途。本文以代謝控制發(fā)酵理論為指導(dǎo)，重點(diǎn)對(duì)L-天冬氨酸產(chǎn)生菌進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)和發(fā)酵條件的初步優(yōu)化。主要研究?jī)?nèi)容結(jié)果如下：
　　 利用HPLC-ELSD法定量測(cè)定發(fā)酵液中L-天冬氨酸含量。色譜條件為：PrevailC18柱，0.06％HFBA水-乙腈溶液(80:20)為流動(dòng)相，柱溫25℃，流速為0.9mL/min，EL，SD漂移管溫度110℃，氣體流量2.8 L，/min。L-天冬氨

2、酸在0.8-3.2mg/mL范圍內(nèi)，線性回歸比非常顯著(R2＝0.9968)，平均回收率達(dá)到100.4％。該法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好，適合于L-天冬氨酸的定量分析。
　　 研究菌株的搖瓶分批發(fā)酵條件。應(yīng)用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和單因素實(shí)驗(yàn)得到種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的配比，優(yōu)化后種子培養(yǎng)基為(g/L)：玉米粉2.5，葡萄糖5，MgSO4.7H2O5，NaCl5，pH7.0～7.2，0.1MPa30min；優(yōu)化后發(fā)酵培養(yǎng)基為(g/L)

3、：水解麥麩60，MgSO4·7H2O4，K2HPO4·3H2O2.96。并對(duì)種子培養(yǎng)條件和發(fā)酵培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究，優(yōu)化后種子培養(yǎng)條件為：初始pH7.0～7.2，裝液量50mL/500mL三角瓶，搖瓶轉(zhuǎn)速為200r/min，培養(yǎng)溫度為32℃，種齡為16h。優(yōu)化搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件為：發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH7.2，裝液量40 mL/500mL三角瓶，搖瓶轉(zhuǎn)速為200r/min，發(fā)酵溫度為32℃，接種量為3％。在優(yōu)化條件下，菌株搖瓶分批發(fā)酵72h，產(chǎn)