腸道菌群與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展關(guān)系.pdf

1、研究背景:
　　類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種以慢性滑膜炎、關(guān)節(jié)軟骨及骨質(zhì)破壞，關(guān)節(jié)畸形和功能喪失為特征的自身免疫性疾病。在早期，主要以侵及指間、手腕等小關(guān)節(jié)為主，多呈對(duì)稱性，通過(guò)自身的免疫應(yīng)答及形成的免疫化合物（由類風(fēng)濕因子主導(dǎo)）進(jìn)一步激活補(bǔ)體來(lái)攻擊自身組織，形成破壞。RA是臨床上較為多見(jiàn)的疾病，發(fā)病時(shí)間長(zhǎng)，損害性大，尚無(wú)確切可靠治療手段，其發(fā)病被認(rèn)為是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，但具

2、體機(jī)制依然不清。近年來(lái)的研究顯示腸道菌群失調(diào)可能是影響RA發(fā)生發(fā)展的一個(gè)重要的環(huán)境因素。研究證明RA動(dòng)物模型的腸道內(nèi)確實(shí)存在菌群失調(diào)，RA患者的腸道菌群也發(fā)生了改變，腸道菌群的正常定植與免疫系統(tǒng)的發(fā)育和免疫耐受的形成密切相關(guān)，腸道菌群失衡會(huì)改變上皮和粘膜通透性，使機(jī)體喪失免疫耐受功能，致敏免疫細(xì)胞和抗原在關(guān)節(jié)處聚集，導(dǎo)致類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病的發(fā)生。但是這方面的研究還剛剛開(kāi)始，關(guān)于腸道菌群的失調(diào)到底是RA的一個(gè)啟動(dòng)因素還是一個(gè)被動(dòng)產(chǎn)物還沒(méi)有

3、定論。RA患者腸道菌群失調(diào)是否存在一定的特征，菌群失調(diào)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展的確切關(guān)系，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用的細(xì)菌成分的篩選都是急待進(jìn)一步研究的課題。
　　目的:
　　1.對(duì)比分析類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者與正常人群腸道菌群多樣性變化和菌群特征，討論腸道菌群失調(diào)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的可能影響。
　　2.探討影響類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病的主要菌群成分及其治療意義。
　　方法:
　　1.根據(jù)美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)RA分類標(biāo)準(zhǔn)，收

4、集類風(fēng)濕性關(guān)炎患者和正常對(duì)照人群的糞便標(biāo)本。
　　2.利用免疫比濁法對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者進(jìn)行類風(fēng)濕因子測(cè)定。
　　3.利用PCR-DGGE指紋圖譜技術(shù)分析正常對(duì)照人群、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者腸道菌群的變化，并利用切膠測(cè)序的方法分析特異性條帶種屬類別。
　　結(jié)果:
　　1.與正常對(duì)照組相比，類風(fēng)濕組的類風(fēng)濕因子明顯增高(P＜0.01)。
　　2.與正常對(duì)照組相比，類風(fēng)濕組的腸道菌群豐度顯著降低(P＜0.01)。

5、>　　3.從聚類分析和PCA分析圖可以看出，正常對(duì)照組與類風(fēng)濕組形成較為明顯的兩個(gè)聚類群。
　　4.測(cè)序結(jié)果顯示，正常對(duì)照組和類風(fēng)濕組DGGE圖譜中有5條變化較大的條帶，條帶1-5分別為變形菌門的Pelobacter venetianus菌，類桿菌門的Prevotella copr菌，硬壁菌門的Dialister succinatiphilus菌，變形菌門的Shigella sonnei菌，硬壁菌門的Sutterella sp.菌

6、。同源性分別為88.15％、95.36％、94.33％、100％,96.4％。條帶1和條帶4主要出現(xiàn)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者組，條帶2和條帶5主要在正常對(duì)照人群，條帶3兩組都有，正常對(duì)照人群多。
　　結(jié)論:
　　1.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者存在腸道菌群失調(diào)，腸道菌群生物多樣性降低。
　　2.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者腸道菌群出現(xiàn)暗桿菌和志賀菌兩個(gè)特征菌種，條件致病菌增多，優(yōu)勢(shì)菌群減少。
　　3.腸道菌群的失調(diào)可能與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生相關(guān)